Síntesis y funcionalización de Nanopartículas de Oro para su direccionamiento a mitocondria. potenciales aplicaciones en radiosensibilización de melanoma

IBAÑEZ, IRENE; MARISA L. TAVERNA PORRO; DURAN, HEBE; ATIA, MARIEL; GRISSI, CECILIA

Workshop; ENN 2018 - Salud y Workshop "Nanomateriales para la Salud"; 2018

El melanoma humano es un tumor altamente agresivo cuya incidencia ha crecido en las últimas décadas. Si bien existen numerosos trabajos de investigación que evalúan diversas estrategias para el control del crecimiento de células resistentes de melanoma, en la actualidad no existe una terapia efectiva. Considerando la alta capacidad metastásica de este tipo de tumor y su falta de respuesta a los tratamientos convencionales de quimio y radioterapia, estudiamos estrategias de radiosensibilización en estas líneas celulares. Una estrategia prometedora consistiría en el uso de nanopartículas multifuncionales en terapias dirigidas selectivamente a este tipo de cáncer y/o a orgánulos esenciales para la adquisición de resistencia a los diversos tratamientos. En este contexto, hemos desarrollado nanopartículas de oro (AuNPs) funcionalizadas con el residuo lipofílico trifenilfosfonio (TPP) para su direccionamiento a mitocondrias. Ha sido demostrado que las células tumorales multi-resistentes resultan susceptibles a la inhibición de la cadena respiratoria mitocondrial y altos niveles basales de especies reactivas de oxígeno (ROS), por lo tanto la disrupción de este metabolismo puede ser utilizada como terapia. En este proyecto, se estudia la combinación del delivery selectivo de las AuNPs a las mitocondrias con tratamientos radiantes, a fin de inducir muerte celular mediada por el incremento de ROS a niveles citotóxicos en las mitocondrias de las células tumorales.Las AuNP se sintetizaron por el método clásico de Turkevich y estas fueron funcionalizadas con el residuo de TPP. Se obtuvieron nanopartículas de 15nm y 5 nm de diámetro. Su morfología, tamaño, potencial zeta y estabilidad fueron evaluados por medio de espectroscopia de UV-Visible, TEM y dispersión de luz dinámica (DLS). Se evaluó la citotoxicidad de las de 15 nm mediante el ensayo de MTT, resultando muy poco citotóxicas inclusive a concentraciones elevadas (100 µg Au/ml).Los resultados demostraron que las AuNPs son extremadamente estables, sin cambiar su morfología durante un largo período de tiempo de almacenamiento. Restan realizar los ensayos biológicos competentes para las AuNps de 5 nm con el objeto de definir las condiciones a ser utilizadas para los experimentos de radiosensibilización, así también como evaluar la sublocalización mitocondrial de las AuNPs funcionalizadas y su eficiencia como radiosensibilizadores. Por el momento se comprobó mediante TEM que ambos tipos de AuNPs-TPP pudieron ingresar a las células.