Métodos analíticos de determinación de Vitamina D en muestras biológicas

FRESIA SILVA SOFRÁS; FRANCISCA AGUILAR LINEROS

Madrid

Congreso; XIII Congreso de Investigación para Estudiantes Pregraduados de Ciencias de la Salud. XVII Congreso de Ciencias Veterinarias y Biomédicas; 2018

Universidad Complutense de Madrid

La determinación de la vitamina D3 en suero humano y de sus metabolitos (25-hidroxi- y 1,25-dihidroxi-vitamina D3) se correlacionan con la carencia o exceso de vitamina D. La alteración de los niveles de vitamina D3 se relaciona con los niveles de calcio y de fosfato en sangre, así como con patologías de malabsorción, hiperparatiroidismo secundario, debilidad muscular, osteoporosis y osteomalacia. Además, la vitamina D tiene un papel fundamental en la regulación del sistema inmunitario. Los métodos analíticos de determinación de vitamina D (Snellman 2010) pueden agruparse en técnicas cromatográficas y métodos inmunoanalíticos. La cromatografía de gases y la cromatografía de líquidos acopladas a espectrometría de masas son metodologías de referencia, si bien la cromatografía de líquidos con detección UV-Vis o DAD, son una excelente elección. No obstante, los límites de detección que proporcionan para los metabolitos, están lejos de la ventajosa sensibilidad que proporciona la detección por espectrometría de masas. Los métodos inmunoanalíticos permiten la detección tanto de la vitamina D3 como de sus metabolitos si necesidad de pre-tratamiento de la muestra, gracias a la especificidad que imponen los anticuerpos. La detección de la reacción inmunoanalítica puede efectuarse mediante radioinmunoanálisis, fluoroinmunoanálisis o quimioluminiscencia. Los límites de detección alcanzados son muy buenos. En la determinación de la vitamina D3 ha de considerarse que el 85 % de la misma se encuentra ligado a proteínas (seroalbumina), por lo que los procedimientos extracción deben ser exhaustivos para evitar perdidas de la misma. En este trabajo se realiza un análisis comparativo critico de los diferentes métodos de cuantificación y de extracción de la vitamina D3 en suero humano.