IQUIMEFA   05518
INSTITUTO QUIMICA Y METABOLISMO DEL FARMACO
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Hipertensión DOCA-Sal y Bulbo Olfatorio. Implicancias de la interacción Sistema Endotelinérgico y Catecolaminérgico Central.
Autor/es:
GUIL M.; SORIA C.; MORALES V.; HOPE S.; BALABASQUER L.; BIANCIOTTI L.; GIRONACCI M.; VATTA M.
Lugar:
Rosario, Prov. de Sta. Fe
Reunión:
Congreso; XX Congreso Argentino de Hipertensión Arterial; 2013
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Hipertensión Arterial (SAHA)
Resumen:
Recientemente demostramos que las endotelinas (ETs) administradas exógenamente en los bulbos olfatorios (BOs) modulan la actividad y expresión de la tirosina hidroxilasa (TH) de manera diferencial en animales normotensos e hipertensos DOCA-Sal. Sobre estos antecedentes nuestro objetivo fue evaluar el papel de las ETs endógenas centrales en la modulación presión arterial (PA) y de la TH, y su implicancia en el modelo DOCA-Sal. Los resultados se analizaron con un ANOVA y test de Student-Newman-Keuls. Primero evaluamos el efecto del bloqueo central agudo del receptor ET-A administrando BQ-610 (antagonista ET-A) vía intracerebroventricular (icv; 20uM, 1ul/min) sobre la PA y la frecuencia cardíaca (FC) durante una hora. Los datos mostraron que el BQ-610 disminuye la PA sólo en ratas DOCA-Sal. Luego los animales fueron sacrificados, se extrajeron los BOs y se determinó la actividad de TH (método radioenzimático) y los niveles totales y fosforiladas de la enzima (Western Blot). Los resultados mostraron que el incremento de la actividad de TH que presentaron los animales hipertensos fue disminuido a valores controles por el BQ-610. Por su parte, los niveles totales y de sus formas fosforiladas (TH-pSer19, TH-pSer31 y TH-pSer40) se encontraron incrementados en animales DOCA-Sal vs normotensos. La administración de BQ-610 en los animales hipertensos redujo los niveles de TH total, TH-pSer 31 y TH-pSer 40 a valores de los controles normotensos. La disminución drástica en los niveles totales de TH observado en ratas DOCA-Sal producido por el agregado de BQ-610 resultó llamativa. Por lo tanto decidimos estudiar el papel del sistema Ubiquitina-Proteasoma, principal responsable de la degradación de TH. Con este propósito se estudió el bloqueo del receptor ET-A en presencia del inhibidor del Proteasoma (MG-132, icv, 20uM, 1ul/min) en ratas normotensas e hipertensas DOCA-Sal. En ratas hipertensas, la administración previa de MG-132 produjo una reversión de la disminución de la PAM producida por el BQ-610. Para corroborar un efecto directo del MG-132 sobre los BOs, se determinó la actividad del Proteasoma. Los resultados mostraron que el inhibidor del Proteasoma administrado icv disminuyó la actividad del mismo, validando así el protocolo empleado. La actividad de TH en los BOs al administrar BQ-610 precedida por MG-132 en ratas hipertensas produjo la reversión parcial del aumento inducido por la sola administración del antagonista ETA. Los niveles de TH total determinados por Western Blot presentaron valores similares a los hallados en BOs de ratas DOCA-Sal al tratar los animales con MG-132+BQ-610. La TH fosforilada en los sitios Serina 19, 31 y 40 mostraron incrementos al tratar los animales hipertensos con MG-132 y reversiones parciales al inyectar MG-132 junto con BQ-610. Estos resultados demostrarían una relación entre la hipertensión arterial del modelo DOCA-Sal y la interacción entre el sistema endotelinérgico endógeno y TH a nivel del los BOs. Además, el sistema Ubiquitina-Proteasoma estaría parcialmente implicado en respuesta a la inhibición del receptor ETA sobre la TH en ratas DOCA-Sal.