Efecto de antisueros generados contra proteínas de extracto crudo de Larrea divaricata en la opsonofagocitosis de Pseudomonas aeruginosa por parte de macrófagos peritoneales de ratón

CANALE FERNANDO; MARTINO RENZO; CASTELL SOLEDAD; MUÑOZ MARCOS; ELICABE JAVIER; MICALIZZI BLAS; MATTAR AÍDA

Mar del Plata

Congreso; LX Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología.; 2012

Larrea divaricata (jarilla) es una planta ampliamente usada en medicina popular. Se ha demostrado que anticuerpos generados contra proteínas de extracto crudo de L. divaricata (PLD) participan la respuesta humoral frente a Pseudomonas aeruginosa. Sin embargo, no hay estudios sobre su contribución en la inmunidad innata. El objetivo de este trabajo fue estudiar el efecto de estos anticuerpos en la opsonofagocitosis de P. aeruginosa ATCC 27853 por macrófagos (MØ) de exudado peritoneal de ratón. Ratones Rockland fueron inmunizados vía s.c. con dos dosis de PLD o proteínas celulares solubles de la bacteria (PCS). Los sueros fueron recolectados 15 días después de la última dosis y decomplementados. Sueros no inmunes fueron empleados como controles. Primero se evaluó el título de IgG contra antígenos bacterianos por ELISA y su capacidad de opsonizar bacterias por IFI. Sueros anti-PLD mostraron una reactividad cruzada significativa con PCS (p≤0.05) y se observó inmunofluorescencia positiva en bacterias incubadas con sueros inmunes. Posteriormente se evaluó la capacidad fagocítica de las bacterias opsonizadas por los MØ. Los mismos se obtuvieron por lavado peritoneal 72 hs luego de una inyección con proteosa peptona y se purificaron por adherencia en placa. Los MØ se incubaron con bacterias opsonizadas (MOI 1:10) con anti-PLD y anti-PCS para los siguientes ensayos: a) n° de bacterias asociadas a MØ por M.O. con tinción de Giemsa, b) fagocitosis por la prueba de reducción de NBT. El estudio por microscopía mostró un aumento en el número de bacterias asociadas a MØ cuando fueron opsonizadas con anti-PLD o anti-PCS (p≤0.05). Por último la reducción de NBT demostró que los sueros inmunes favorecieron la producción de anión superóxido durante la fagocitosis (p≤ 0.05). Esto indicaría que anticuerpos anti-proteínas de Larrea divaricata actúan como opsoninas frente P. aeruginosa; contribuyendo, de este modo, a la respuesta inmune innata.