Participación de la kinasa activada por AMP (AMPK) en los efectos del poscondicionamiento isquémico (PC) sobre la transición de la permeabilidad mitocondrial en corazones de rata sometidos a isquemia global flujo cero – reperfusión

TORRESIN ME, VÉLEZ DÉBORA, HERMANN R, SAVINO E, VARELA A, MARINA PRENDES MG.

Congreso; LV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica”, Mar del Plata; 2010

Trabajos anteriores demostraron que el PC mejora la recuperación funcional en corazones de rata perfundidos Langendorff sometidos a isquemia global flujo cero (I) (25 min) - reperfusión (RP) (30 min), preserva la permeabilidad del sarcolema, disminuye el daño oxidativo, aumenta la relación glutatión reducido/glutatión oxidado (GSH/GSSG) y estimula el consumo de glucógeno. El objetivo fue explorar si el compuesto C (CC), inhibidor de la AMPK revierte estos efectos beneficiosos. El PC consistió en 6 ciclos de RP (10 seg) - I (10 seg) al finalizar la isquemia sostenida. El CC (10 μM) fue administrado en el medio de perfusión durante los primeros 5 minutos de RP tanto en corazones controles como poscondicionados. Se midió la recuperación contráctil [Presión sistólica pico x Frecuencia (PxF), velocidad de contracción y de relajación (±dP/dt)], liberación de creatina kinasa (CK), relación GSH/GSSG, daño oxidativo mediante las sustancias reactivas al ácido tiobarbitúrico (TBARS) y el consumo de glucógeno. La estadística se hizo con ANOVA (n=8). El CC no alteró la recuperación funcional en corazones controles, pero revirtió los efectos del PC (PC vs PC+CC, 25 min RP: PxF 57,88±2,50 vs 33,94±3,00 p<0,01; +dP/dt 64,63±6,05 vs 41,00±6,35 p<0,01; -dP/dt 82,18±10,87 vs 57,31±9,34 p<0,01). No modificó ninguno de los parámetros bioquímicos medidos en los corazones controles. Revirtió parcialmente el efecto del PC sobre el consumo de glucógeno (30 min RP PC vs PC+CC: 10,33±3,39 vs 42,25±6.12 los primeros 5 minutos de RP tanto en corazones controles como poscondicionados. Se midió la recuperación contráctil [Presión sistólica pico x Frecuencia (PxF), velocidad de contracción y de relajación (±dP/dt)], liberación de creatina kinasa (CK), relación GSH/GSSG, daño oxidativo mediante las sustancias reactivas al ácido tiobarbitúrico (TBARS) y el consumo de glucógeno. La estadística se hizo con ANOVA (n=8). El CC no alteró la recuperación funcional en corazones controles, pero revirtió los efectos del PC (PC vs PC+CC, 25 min RP: PxF 57,88±2,50 vs 33,94±3,00 p<0,01; +dP/dt 64,63±6,05 vs 41,00±6,35 p<0,01; -dP/dt 82,18±10,87 vs 57,31±9,34 p<0,01). No modificó ninguno de los parámetros bioquímicos medidos en los corazones controles. Revirtió parcialmente el efecto del PC sobre el consumo de glucógeno (30 min RP PC vs PC+CC: 10,33±3,39 vs 42,25±6.12 μM) fue administrado en el medio de perfusión durante los primeros 5 minutos de RP tanto en corazones controles como poscondicionados. Se midió la recuperación contráctil [Presión sistólica pico x Frecuencia (PxF), velocidad de contracción y de relajación (±dP/dt)], liberación de creatina kinasa (CK), relación GSH/GSSG, daño oxidativo mediante las sustancias reactivas al ácido tiobarbitúrico (TBARS) y el consumo de glucógeno. La estadística se hizo con ANOVA (n=8). El CC no alteró la recuperación funcional en corazones controles, pero revirtió los efectos del PC (PC vs PC+CC, 25 min RP: PxF 57,88±2,50 vs 33,94±3,00 p<0,01; +dP/dt 64,63±6,05 vs 41,00±6,35 p<0,01; -dP/dt 82,18±10,87 vs 57,31±9,34 p<0,01). No modificó ninguno de los parámetros bioquímicos medidos en los corazones controles. Revirtió parcialmente el efecto del PC sobre el consumo de glucógeno (30 min RP PC vs PC+CC: 10,33±3,39 vs 42,25±6.12 μg/100 mg peso seco, p<0,05). También revirtió el efecto protector sobre la preservación de GSH/GSSG (PC vs PC+CC: 17.69±4.64 vs 10.39±1.23 p<0,05), sobre el daño oxidativo (TBARS: PC vs PC+CC: 12.12±2.51 vs 20.71±3.80 nmol/g húmedo p<0,05) y la liberación de CK (PC vs PC+CC: 70,09±6,90 vs 162,17±4,46 UI/g húmedo p<0,05) Los resultados sugieren que la AMPK estaría involucrada en los efectos beneficiosos del PC explorados en el presente trabajo. sobre la preservación de GSH/GSSG (PC vs PC+CC: 17.69±4.64 vs 10.39±1.23 p<0,05), sobre el daño oxidativo (TBARS: PC vs PC+CC: 12.12±2.51 vs 20.71±3.80 nmol/g húmedo p<0,05) y la liberación de CK (PC vs PC+CC: 70,09±6,90 vs 162,17±4,46 UI/g húmedo p<0,05) Los resultados sugieren que la AMPK estaría involucrada en los efectos beneficiosos del PC explorados en el presente trabajo. g/100 mg peso seco, p<0,05). También revirtió el efecto protector sobre la preservación de GSH/GSSG (PC vs PC+CC: 17.69±4.64 vs 10.39±1.23 p<0,05), sobre el daño oxidativo (TBARS: PC vs PC+CC: 12.12±2.51 vs 20.71±3.80 nmol/g húmedo p<0,05) y la liberación de CK (PC vs PC+CC: 70,09±6,90 vs 162,17±4,46 UI/g húmedo p<0,05) Los resultados sugieren que la AMPK estaría involucrada en los efectos beneficiosos del PC explorados en el presente trabajo.