UMYMFOR   05516
UNIDAD DE MICROANALISIS Y METODOS FISICOS EN QUIMICA ORGANICA
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
CUANTIFICACIÓN DE BISFENOL-A EN SANGRE DE CORDÓN UMBILICAL A NIVEL DE TRAZAS POR UPLC-MS/MS
Autor/es:
GABRIEL G. CASES; MARIANA L. MÉNDEZ; MARÍA I. GIMÉNEZ; GUSTAVO J. CALINSKI
Lugar:
Rosario
Reunión:
Congreso; III CONGRESO ARGENTINO DE ESPECTROMETRÍA DE MASAS; 2016
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Espectrometría de Masas
Resumen:
El Bisfenol-A (BPA) es el ingrediente principal en la producción de policarbonato, poliéster insaturado, resinas de polisulfona y epoxi. Los materiales que contienen BPA se han utilizado para muchas aplicaciones por lo que está presente en productos de uso cotidiano y masivo. Desde hace décadas se conoce la débil estrogenicidad que provoca el BPA imitando la acción de la hormona endógena .Se lo designa como ?disruptor endócrino? (DE) y sus efectos inciden en el desarrollo gonadal y del sistema nervioso central. La exposición al DE influye en el feto causando efectos en la descendencia y su toxicidad puede darse a dosis muy bajas, más allá de los límites que generalmente se consideraban seguros. Es por ello que se plantea la necesidad de cuantificar trazas de BPA en sangre de cordón umbilical para estudiar la exposición al mismo y sus efectos en la población de nuestro país. Con ese objetivo se desarrolla un método analítico por UPLC-MS/MS.El problema más notorio a sortear en el análisis de ultra trazas de BPA es que está presente como ?contaminación de fondo? (background) lo que dificulta lograr bajos límites de detección. Es componente del plástico de la mayoría de los materiales utilizados en el laboratorio (tips, tapas de viales y botellas, viales Eppendorf, etc.), de las tubuladuras por donde circula la fase móvil (FM) e incluso en los mismos solventes.1 Además puede aparecer en el agua ultrapura utilizada en el laboratorio debido a que los filtros de polisulfona del equipo de purificación están hechos a partir del mismo. Fue necesaria una rigurosa revisión de las fuentes de contaminación para identificarlas y poder minimizarlas o evitarlas. Sin embargo, utilizando un gradiente de elución cromatográfico, el pico de BPA seguía estando presente tanto en inyecciones de muestras blanco como en inyecciones con volumen cero. Luego de una serie de ensayos se concluyó que trazas de BPA presentes en la FM se van reteniendo y enriqueciendo en el frente de la columna durante su acondicionamiento, donde la fuerza de elución es baja. El uso de FM con mayor poder de elución y en modo isocrático evitó la acumulación de BPA y su presencia como background.2 El método desarrollado consiste en una precipitación de proteínas por agregado de acetonitrilo y posterior centrifugado e inyección del sobrenadante. La espectrometría de masa se realizó empleando Electrospray negativo [ESI (?)] en modo de monitoreo de reacciones múltiples (MRM), los iones utilizados son: 227.1>212.1 (cuantificación) y 227.1>133.1 (confirmación). Rango lineal: 1.1 a 11.1 ng/mL, Límite Inferior de Cuantificación (LIC): 0.9 a 1.3 ng/mL, Límite Superior de Cuantificación (LSC): 9.4 a 12.8 ng/mL, Límite de Detección (LD): 0.6 ng/mL. Se analizaron en total 390 muestras de sangre de cordón umbilical de niños nacidos en el Hospital Italiano entre los años 2013-2014.