CUANTIFICACIÓN SIMULTÁNEA DE MEROPENEM, IMIPENEM Y CEFTAZIDIMA EN PLASMA POR LC-MS/MS

PÉREZ, MARÍA L.; CASES, GABRIEL G; CALINSKI, GUSTAVO J; GIMÉNEZ, MARÍA I.; MÉNDEZ, MARIANA L.

Buenos Aires

Congreso; 71º Congreso Argentino de Bioquímica; 2015

Asociación Bioquímica Argentina

Introducción: Los Beta-lactámicos (Beta-LACT) son los antibióticos más frecuentemente prescriptos para el tratamiento de infecciones bacterianas, pero las dosificaciones estándar no siempre se traducen en dosis terapéuticas debido a que, en ciertos pacientes, hay alta variabilidad farmacocinética.Es por esto que el monitoreo de las concentraciones de Beta-LACT en plasma y la consiguiente optimización de la dosis puede ofrecer una solución para lograr la concentración adecuada.Se validó la cuantificación simultánea de Imipenem y Meropenem (carbapenems) y Ceftazidima (Cefalosporina) en plasma. Debido a que son moléculas polares pequeñas no puede utilizarse cromatografía en fase reversa, en su lugar se utiliza cromatografía de interacción hidrofílica.La validación fue compleja debido a que el Imipenem sufre una rápida descomposición y la ceftazidima tiene baja reproducibilidad en las áreas.Objetivo del estudio: Desarrollar un método de cromatografía líquida asociada a espectrometría de masa (LC-MS/MS) para la determinación simultánea de Meropenem, Imipenem y Ceftazidima en plasma.Metodología empleada: La cuantificación de Beta-LACT en plasma consiste en una precipitación de proteínas con acetonitrilo y metanol, centrifugación y dilución del sobrenadante con acetonitrilo y metanol. Finalmente se inyecta en el UPLC-MS/MS.Tiempo de análisis: 5 minutos. Volumen de plasma utilizado: 50 µL. Columna: Acquity UPLC BEH HILIC 1.7 µm (2.1x 100 mm).Transiciones utilizadas (modo MRM ESI+):Imipenem 300.1> 142.0. Meropenem 384.5 > 141.1. Ceftazidima 546.9 > 468.2Resultados obtenidos: CompuestoLLOQ (µg/mL)Rango de linealidad (µg/mL)Coeficiente de correlación (r2)Imipenem0.30.3-100.992Meropenem1.01.0-500.994Ceftazidima1.01.0-1000.996Estabilidad en plasma a -20ºC: Meropenem y Ceftazidima : 2 meses e Imipenem: menos de 24 horas.Conclusiones: Se desarrolló un método LC-MS/MS rápido para la determinación simultánea de 3 antibióticos Beta lactámicos en plasma. El análisis de muestras que contienen Imipenem debe ser realizado en el día de toma de muestra ya que el antibiótico es inestable. La adecuación del método de masas y del método cromatográfico mejoraron la reprodubilidad en las áreas de Ceftazidima. Por otro lado se está desarrollando un método para medir los mismos antibióticos en lavado broncoalveolar (BAL) para poder establecer la relación de concentraciones entre plasma y BAL.