Análogos de ligandos naturales de los receptores LXR y DAF-12: Síntesis, activida biológica y estudios in silico

DANSEY, MARÍA V.; SAMAJA, GISELA; ALVAREZ, LAUTARO D.; DEL FUEYO, M. CELESTE; NAVALESI, DANIELA; VELEIRO, ADRIANA S.; PECCI, ADALÍ; BURTON, GERARDO

Mar del Plata

Congreso; XIX SINAQO; 2013

Sociedad Argentina de Investigación en Química Orgánica

El receptor nuclear DAF-12 del nematodo C. elegans es un componente clave que modula longevidad, fertilidad y desarrollo en respuesta a las condiciones del entorno. El LXR (Liver X Receptor) posee una alta homología con el DAF-12 y ha sido identificado como un receptor nuclear asociado a la expectativa de vida en humanos. El LXR induce la expresión de genes involucrados en el metabolismo de colesterol y modula la respuesta inflamatoria e inmune en macrófagos. Los ligandos naturales del receptor DAF-12 son derivados de ácidos colestenóicos denominados ácidos dafacrónicos (por ej. 1), mientras que el LXR es activado por oxiesteroles relacionados al colesterol (por ej. 24,25-epoxicolesterol). Los ácidos colestenoicos 2-(25S) y 2-(25R) son ligandos de los receptores DAF-12 y LXR respectivamente. En trabajos previos demostramos que el ácido 27-nor-dafacrónico 3 es activo en ensayos in vitro (transactivación) e in vivo en C. elegans.1 Se sintetizaron los análogos 4-11, donde se varió la longitud y rigidez de la cadena lateral. Los compuestos 4-8 se sintetizaron a partir de ácido hiodesoxicólico, mientras que los análogos 9-11 se obtuvieron a partir de 20b-carboxialdehido-4-pregnen-3-ona. Los compuestos 5 y 10 indujeron la actividad del DAF-12 en ensayos de transactivación realizando co-transfecciones transientes del vector de expresión pCMX-GAL4-DAF-12LBD y del reportero pGL2 luciferasa en cultivos de células HEK 293T. Los compuestos 4 y 8 mostraron actividad como antagonistas al ser co-incubados con el agonista GW3965 [10-6M] de los receptores LXRa y LXRb en células HEK-293T co-transfectadas con los respectivos vectores de expresión y el gen reportero pLRE-LUC. Además se demostró mediante ensayos de RT-qPCR, que los compuestos 4 y 8 inhiben la inducción mediada por el agonista GW3965 de los genes endógenos FAS (fatty acid synthase) y SREBP (Sterol Regulatory Element-Binding Proteins). En todos los casos se modeló la interacción ligando-receptor mediante simulaciones de dinámica molecular utilizando un modelo de homología2 para el dominio de unión al ligando (LBD) de DAF-12 y partiendo de la estructura de Rayos X del LBD en el caso del receptor LXR.