UMYMFOR   05516
UNIDAD DE MICROANALISIS Y METODOS FISICOS EN QUIMICA ORGANICA
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Azaesteroides sintéticos contra el virus Herpes simplex tipo 1 y clones resistentes a aciclovir
Autor/es:
MARÍA E DÁVOLA; LAURA ALCHÉ; JAVIER A. RAMIREZ; ANDREA BARQUERO
Reunión:
Congreso; XXXII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Virología (SAV); 2012
Resumen:
El desarrollo de antivirales con nuevas estrategias de inhibición continúa siendo un desafío dado que las infecciones virales son una de las primeras causas de muerte mundial. Algunos de los mecanismos alternativos que se proponen son afectar con la misma droga múltiples blancos virales o interferir con factores celulares que sean esenciales para la propagación viral. El virus Herpes simplex tipo 1 (HSV-1) es un patógeno humano que produce lesiones cutáneas leves, pero también puede provocar enfermedades graves como encefalitis. El aciclovir (ACV) es el tratamiento más efectivo disponible para las infecciones causadas por HSV-1, pero desafortunadamente, en pacientes inmunocomprometidos que reciben  tratamientos prolongados con ACV se desarrollan cepas resistentes a esta droga. Recientemente hemos publicado que varios azaesteroides sintéticos con cadena diamida N-sustituida en el C 20 (U20) presentan actividad antiviral in vitro contra HSV-1 cepa KOS. Inesperadamente, sólo algunos de los derivados activos inhibieron la cepa ACV-resistente B2006 aislada de un paciente inmunocomprometido. Una nueva serie de azaesteroides con la cadena diamida N-sustituida en el C 16 (U16) también resultaron activos contra KOS. Los objetivos de este trabajo fueron ampliar el estudio de la actividad anti-HSV-1 de estos derivados esteroidales y evaluar su efecto sobre cepas ACV-resistentes obtenidas a partir de la cepa KOS disponible en el laboratorio. Primero, se estudió la actividad virucida de dos derivados incubando el stock viral de KOS con 100µM de los compuestos y titulando por el método de placas. Ninguno de los análogos ensayados disminuyó significativamente el título viral respecto del control. Luego, se analizó la efectividad de los mismos compuestos agregados a distintos tiempos: Pretratamiento (14hs), durante la hora de adsorción y postratamiento (0, 1, 3, 5 y 7hs pi), cuantificando el rendimiento viral a las 24hs por el método de placas. Los resultados obtenidos mostraron que cuando las células se pretrataron con los compuestos o se agregaron durante la adsorción del virus, el título viral no disminuyó significativamente respecto del control. En el caso del postratamiento, la mayor disminución se observó al añadir los compuestos a las 0hs pi. Para evaluar el segundo objetivo, los clones resistentes a ACV se aislaron a través de un único pasaje de la cepa KOS en presencia de 100 o 200µM de dicha droga, se amplificaron y se titularon por el método de placas. La actividad anti-cepas ACV-resistentes de varios azaesteroides se cuantificó mediante ensayos de inhibición del rendimiento viral y de inmunofluorescencia. Como lo observado con los derivados U20 para la cepa B2006, sólo cuatro de los ocho U16 inhibieron los clones resistentes a ACV seleccionados in vitro. En conclusión, los azaesteroides evaluados en este estudio no presentaron actividad virucida contra HSV-1; parecerían afectar más de una etapa del ciclo de multiplicación viral de la cepa KOS y su efectividad diferencial frente a mutantes ACV-resistente sería independiente del origen de la cepa.