Síntesis de 21-qacetoxi-17-alfahidroxi-4-pregnen-3,20-diona catalizada por una lipasas recombinante de Rhizopus oryzae inmobilazada

P: G. QUINTANA; F. VALERO; J. M. PALOMO; A. BALDESSARI

Villa Carlos Paz

Simposio; XVIII Simposio Nacional de Química Orgánica; 2011

Sociedad Argentina de Investigación en Química Orgánica

SÍNTESIS DE 21-ACETOXI-17-α-HIDROXI-4-PREGNEN-3,20-DIONA CATALIZADA POR UNA LIPASA RECOMBINANTE DE RHIZOPUS ORYZAE INMOVILIZADA Paula G. Quintana1, Francisco Valero2, José M. Palomo3, Alicia Baldessari1. 1 Laboratorio de Biocatálisis. Departamento de Química Organica y UMYMFOR (CONICET), Facultad de Ciencias exactas y Naturales,Universidad de Buenos Aires, C1428EGA, Buenos Aires, Argentina, 2 Departament d’Enginyeria Química. Escola d’Enginyeria. Universitat Autònoma de Barcelona. 08193 Bellaterra ,Barcelona, España. 3 Instituto de Catálisis (CSIC), Departamento de Biocatálisis, Marie Curie 2, Cantoblanco campus UAM, 28049, Madrid, España. e-mail: pquintana@qo.fcen.uba.ar Rhizopus oryzae es un hongo lipolítico filamentoso que produce únicamente una lipasa extracelular (ROL). Esta lipasa presenta un alto potencial biotecnológico debido a su comportamiento regioselectivo en reacciones de modificación de lípidos. Ha sido clonada y expresada en diferentes hospedadores tales como Escherichia coli, Saccharomyces cerevisiae y Pichia pastoris, con el fin de incrementar su producción, siendo este último el que ofrece mayores ventajas. La actividad y especificidad de sustratos sencillos para la ROL recombinante (rROL) expresada en Pichia pastoris y la ROL comercial (nROL), fueron comparadas previamente.1 Con el fin de ampliar el rango de posibles blancos de modificación surgió la idea de usar un esteroide como sustrato de ambas enzimas.2 En el presente trabajo fueron utilizadas como catalizadores en la síntesis del derivado acetilado en la posición 21 de 21,17-α-dihidroxi-4-pregnen-3,20-diona (cortexolona) (1). Este derivado de cortexolona (2) puede ser biotransformado al derivado 21 acetilado de la hidrocortisona que presenta actividad aniinflamatoria en preparaciones tópicas. Se evaluaron ambas enzimas y se ensayaron distintos agentes acetilantes, optimizando la reacción a través de la determinación de diversos parámetros como solvente, relación enzima sustrato, enzima agente acetilante, tiempo de reacción y temperatura. Con el objeto de aumentar la eficiencia de rROL, que era poco activa a temperatura ambiente e inestable a mayores temperaturas, se procedió a estudiar técnicas de inmovilización.3 rROL fue inmovilizada sobre variados soportes, obteniéndose los mejores resultados usando Lewatit 1600. En estas condiciones se obtuvo el producto con alto rendimiento. De acuerdo a los resultados obtenidos se puede concluir que la estrategia enzimática es conveniente en la síntesis de este derivado, y la ROL recombinante (rROL) presenta mayor actividad que la enzima comercial (nROL). Referencias 1. Guillén, M.; Benaiges, M.D.;Valero, F.; Biochemical Engineering Journal 2011, 54, 117-123. 2. Quintana, P.G.; Baldessari, A.; Steroids 2009, 74, 1007-1014. 3. Mateo, C.; Palomo , J. M.; Fernandez-Lorente, G.; Fernandez-Lafuente, R.; Guisán, J. M.; Enzyme Microb. Technol.2007, 40,1451-1463.