Regulación del promotor 1 de Bcl-X por EGF en células epiteliales mamarias HC11

LEONARDO ROMORINI; DIEGO GRINMAN; OMAR A. COSO; ADALI PECCI

Hotel 13 de Julio, Mar del Plata, Argentina

Congreso; LIV Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica SAIC; 2009

SAIC

EGF activa vías de señalización asociadas con la proliferacióncelular y la apoptosis. Hemos demostrado previamente que laregulación de los niveles proteicos y de ARNm de Bcl-XL(antiapoptótica) es fundamental en la inhibición de la apoptosismediada por EGF en células epiteliales mamarias HC11, siendoPI3K/AKT la principal vía involucrada. En este trabajo estudiamoscuál/es de los cinco promotores y cuál/es factores de transcripciónmedian la expresión de bcl-x por EGF. Se cuantificaron losniveles de los transcriptos generados a partir de los distintos promotoresde bcl-x por RT-qPCR y se observó que sólo los nivelesde los transcriptos provenientes del promotor 1 (P1) aumentanluego del tratamiento con EGF (2±0,1 veces vs. control). Esta inducciónes bloqueada por LY294002, inhibidor de PI3K (1,1±0,01veces vs. control). El análisis in sílico de la secuencia de P1 revelóla presencia de sitios de unión de los factores de transcripciónAP1, ETS, NFKB, STAT5, CREB y C/EBP, todos ellos plausiblesde ser activados por EGF. Se co-transfectaron células HC11con un vector reportero pP1-Luc junto con vectores de expresiónde AKT y los distintos factores mencionados. Se observó que AKT,Ets-2 y CREB activan a P1 (1,4±0,1; 1,8±0,1 y 3,5±0,2 veces vs.control, respectivamente). Conclusión: La activación de PI3K/AKTpor EGF aumenta los niveles de bcl-x por regulación de P1, siendoCREB y/o Ets-2 posibles factores mediadores de este efecto.