IFIBYNE   05513
INSTITUTO DE FISIOLOGIA, BIOLOGIA MOLECULAR Y NEUROCIENCIAS
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
ESTUDIO COMPARATIVO DE TRES ANTISUEROS UTILIZADOS PARA LA INMUNOMARCACION DEL RECEPTOR DE GLUCOCORTICOIDES EN HIPOFISIS DE LARVAS DE Rhinella arenarum
Autor/es:
MIJAL DISTLER; LUCAS D. JUNGBLUT; DANTE A. PAZ; ANDREA G POZZI
Lugar:
Córdoba, Argentina
Reunión:
Congreso; Primer Encuentro Internacional Virtual de Educación e Investigación en Ciencias Morfológicas; 2009
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Ciencias Morfológicas, II Cátedra de Biología Celular, Histología y Embriología y Cátedra de Informática Médica de la Facultad de Ciencias Médicas de la Universidad Nacional de Córdoba
Resumen:
Los corticosteroides (mineralocorticoides y glucocorticoides) son hormonas esteroideas que ejercen su función mediante la unión a receptores citoplasmáticos los cuales actúan como factores de transcripción dependientes de ligando. En vertebrados, se identificaron dos tipos de receptores que se diferencian de acuerdo a su afinidad por el ligando: los de tipo I poseen mayor afinidad por los mineralocorticoides, mientras que los de tipo II presentan mayor afinidad por los glucocorticoides; es por esto que al primero se lo conoce como receptor de mineralocorticoides (MR) mientras que el segundo es el receptor de glucocorticoides (GR).  Existen evidencias que sugieren que el GR presenta, a su vez, distintas isoformas. El objetivo del presente trabajo es validar el uso de distintos antisueros heterólogos para la inmunomarcación del GR en la hipófisis durante el desarrollo larval del sapo Rhinella arenarum. Para esto se utilizaron tres antisueros desarrollados en conejo a partir de: antígenos de origen humano (Ab1) , murino (Ab2) y anfibio (Xenopus laevis) (Ab3). Los ensayos inmunohistoquímicos demostraron la inmunomarcación del receptor de GR en distintos tipos celulares, en función del antisuero utilizado. Así, cuando se emplea el Ab1 la inmunomarca queda restringida a la región correspondiente a la pars distalis mientras que el antisuero Ab2 reveló presencia del GR tanto en pars distalis como en pars intermedia. Por otra parte Ab3 solo mostró inmunomarcación en la pars intermedia.  Además, en el análisis por Western Blot se observó un patrón de bandas que difiere para los tres antisueros. Finalmente para confirmar la especificidad de la inmunomarca, se realizaron distintos controles que incluyeron traslocación al núcleo por tratamiento con corticosterona y  preabsorción con el antígeno, además de la omisión del anticuerpo primario. Estos resultados en conjunto sugieren que  los antisueros utilizados podrían estar revelando la presencia de distintas isoformas del GR.