Anomalías núcleo-citoplasmáticas en embriones peri-implantatorios de ratón y pérdida temprana de la gestación frente a la ingesta materna de alcohol

LETICIA PEREZ TITO; TAMARA A. COLL; CRISTIAN SOBARZO; MARÍA EUGENIA VILLAR; MARTA D. MUDRY; ELISA CEBRAL

Mar del Plata- Argentina

Congreso; II Congreso Argentino de la Sociedad de Toxicología y Química Ambiental (SETAC).; 2008

SETAC

La ingesta semicrónica de alcohol al 10% antes de la fecundación y durante la gestación eleva la tasa de aborto temprano, de crecimiento retrasado y produce anomalías morfológicas en el embrión organogénico al día 10 de preñez. A su vez, las hembras tratadas (HT) presentan alteraciones severas del ciclo estral con menores frecuencias ovulatorias (estros), elevado % de oocitos partenogénicos y desregulación de la diferenciación embrionaria de preimplantación (menor porcentaje de mórulas y alto porcentaje de blastocistos expandidos). Objetivo: Analizar las alteraciones núcleo-citoplasmáticas en el blastocisto (día 4 de gestación) y embrión en estadio de huevo cilíndrico (estadio E.7, día 7 de gestación) ocasionadas por la ingesta periconcepcional de 10% de alcohol en el agua de bebida. Materiales y métodos: Tanto en las HT como hembras controles (HC) suministradas con agua como bebida, se evaluó la calidad morfológica de los blastocistos por microscopia óptica y el número (Nro.) de núcleos/embrión e índice mitótico (IM) por la técnica de Tarkowski. En embriones E.7 se analizó la calidad histológica (HyE), las alteraciones nucleares por técnicas de marcación con fluorocromos y la tasa proliferativa embrio-trofoblástica por inmunohistoquímica para PCNA. Resultados: Las HT presentaron un elevado Nro.de blastocistos anormales con fragmentos en el macizo celular interno, trofoectodermo y blastocele. Se observó un retraso en la aparición de la cavidad con un aceleramiento en la expansión del blastocele, que resultó anormal vs. los embriones de las hembras controles (HC). El 54% de los blastocistos iniciales sin cavidad de las HT presentó un elevado Nro. Núcleos/embrión vs. los embriones de las HC, pero la mayoría de los blastocistos expandidos de las HT tuvieron menor Nro. núcleos/embrión vs los de las HC (72% vs 40%), junto con menor IM y reducido % de blastocistos mitóticos. Estas anomalías se reflejaron en detenimiento y/o retraso del desarrollo del embrión E.7 posiblemente por defectos histo-morfológicos de las células trofoblásticas (picnosis nuclear) y aberraciones nucleares del embrión en gastrulación (apoptosis). Conclusión: La exposición perigestacional de alcohol en el modelo murino podría ocasionar desbalances del desarrollo del blastocisto con efectos genotóxico-nucleares que redundarían en pérdida temprana de la gestación en la fase peri-implantativa.