LAS EXPERIENCIAS OLFATIVAS PRE-IMAGINALES EN APIS MELLIFERA INFLUYEN SOBRE LA EXPRESION DE GENES ASOCIADOS CON LA PLASTICIDAD SINÁPTICA?

RAMÍREZ GABRIELA P.; GROSSO JUAN P.; ARGIBAY PABLO F.; FARINA WALTER M

Posadas

Congreso; IX CONGRESO ARGENTINO DE ENTOMOLOGIA; 2015

SOCIEDAD ARGENTINA DE ENTOMOLOGIA

La plasticidad del sistema nervioso no es exclusiva de vertebrados. Los insectos, y particularmente la abeja melífera, son excelentes modelos experimentales para evaluar cambios dinámicos producto de la experiencia a nivel SNC. Las abejas Apis mellifera de la casta obrera experimentan ambientes sensoriales cambiantes durante la adultez que han sido correlacionados con cambios anatómicos y funcionales a nivel cerebral. Particularmente la plasticidad en las vías olfativas en insectos está inducida por el aprendizaje asociativo y las experiencias sensoriales. Las abejas melíferas se enfrentan a un ambiente variable al buscar recursos florales. Este hecho las obliga a extinguir memorias existentes cuando se agota un recurso floral para generar nuevas cuando encuentran un recurso que sí ofrece recompensa. Las vías olfativas tambiéndeben responder a estas fluctuaciones. En este sentido, la arquitectura sináptica de los centros superiores de procesamiento olfativo es altamente plástica porque nuevas conexiones sinápticas se establecen cuando las abejas encuentran y aprenden nuevos estímulos olfativos durante la recolección. Existen proteínas de membrana ubicadas en las terminales axónicas de las neuronas (pre-sinápticas) denominadas neuroxinas (Nrx), y otras ubicadas en las terminales dendríticas  (post-sinápticas) denominadas neuroliginas (Nlgs) que tienen por finalidad mantener los componentes del citoesqueleto de las neuronas para la localización de las vesículas sinápticas. La expresión de dichas moléculas es utilizada como un indicador de conectividad sináptica tanto en vertebrados como en invertebrados, e incluso se han registrado cambios en distintas especies durante el aprendizaje asociativo. En la abeja, estas proteínas se expresan durante todo su desarrollo. Existen evidencias que indican que su expresión se ve modificada en función de experiencias sensoriales. Sin embargo, no se ha evaluado aun cómo se modifica su expresión en función de las experiencias olfativas tempranas. En este trabajo se compara la expresión de las Nrx y Nlgs en abejas adultas que tuvieron o no experiencias olfativas durante sus estadios larvales (pre-imaginales). Para ello se alimentaron colmenas mediante alimentadores artificiales con una dieta azucarada aromatizada o sin aromatizar. Se seleccionaron cuadros de cría en estadio de huevo y se ofreció la dieta durante todo el desarrollo larval. Una vez avanzado el estadio de pupa, el desarrollo continuó en el laboratorio bajo condiciones reguladas de temperatura y humedad hasta el momento de la eclosión como adultos. Los mismos fueron luego confinados en grupos de 120 individuos dentro de cajas de madera, alimentados con dieta azucarada sin aromatizar y polen ad libitum, y mantenidos en condiciones ambientales controladas hasta el momento de la disección de los cerebros (entre 3 y 7 días de adulto). Los cerebros fueron utilizados para cuantificar la expresión génica de las Nrx y Nlgs. La disección de los mismos incluyó la eliminación de los lóbulos ópticos. Así los cerebros fueron mantenidos en crio-viales en N2 líquido hasta el momento de la extracción de ARN. Los niveles de expresión de Nrx y Nlgs en cerebros de abejas con o sin experiencias olfativas pre-imaginales fueron estimados mediante el análisis de una qRT-PCR. Estas experiencias tempranas no modificaron la expresión de estos genes; sin embargo, para una de las Nlg (Nlg3) se evidenció una tendencia a mayores niveles de expresión en individuos tratados. Este resultado concordaría con las evidencias acerca de que las abejas adultas modulan la expresión de estos genes dependiendo de la experiencia.