Contribución de las diferentes funciones de Bcatenina en la progresión tumoral y metástasis en cancer de mama. Estudio in vivo.

NATALIA RUBINSTEIN.; MEERA SAXENA; DAVID BÜCHEL; CLAUDIO CANTU; KONRAD BASLER; GERHARD CHRISTOFORI

Congreso; LIX Reunion Cientifica Anual Sociedad Argentina de Investigacion Clinica; 2014

La vía de señalización Wnt/Bcatenina (Bcat) ha sido estudiada en distintos tumores. Bcat es una proteína de acción dual, pudiendo interaccionar con Ecaderina y participar en uniones celulares, así como translocar al núcleo y regular la transcripción de genes. Para evaluar la contribución de las distintas funciones de Bcat en forma específica en cáncer de mama desarrollamos 3 modelos in vivo con ratones knockout (KO) y knockin (KI) conteniendo el oncogen PyMT. Para investigar la participación de Bcat salvaje en la progresión tumoral se generaron ratones KO condicionales (Bcat fl/fl; MMTV-CRE+/-). El volumen tumoral y metástasis pulmonar no se vieron alterados frente a la ausencia de Bcat. Análisis del DNA y ensayos de imunofluorescencia de los tumores mostraron que la eliminación de Bcat no fue total. Para investigar este fenómeno, generamos líneas celulares a partir de tumores primarios CRE-/- , que al ser transducidas con un vector conteniendo GFP-IRES-CRE fueron capaces de delecionar el gen Bcat fl/fl y murieron por apotosis, comparadas con las células control (GFP-IRES). Para evaluar la contribución de Bcat nuclear sin alterar su función adherente generamos en forma independiente: un ratón KI conteniendo Bcat mutante (DA) incapaz de unirse a Bcl9/L (βcat fl/DA; MMTV-CRE+/-); y otro ratón KI conteniendo Bcat mutante (DC) con el C-terminal delecionado e incapaz de unirse a cofactores (βcat fl/DC; MMTV-CRE+/-). Tanto la expresión de DA como DC, redujeron significativamente la progresión tumoral y metástasis. Ambas mutantes funcionaron como dominante negativo cuando Bcat salvaje también estaba presente. Estos resultados sugieren por primera vez que Bcat contribuye de manera diferencial en un modelo de cáncer de mama in vivo. Bcat completa es necesaria para la sobrevida de las células tumorales, mientras que su participación en la progresión y metástasis tumoral depende de su capacidad de unir Bcl9/L y cofactores relevantes en la regulación de genes blancos.