IFIBYNE 05513
INSTITUTO DE FISIOLOGIA, BIOLOGIA MOLECULAR Y NEUROCIENCIAS
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Estudio del receptor de glucocorticoides en líneas celulares de cáncer de próstata.
Autor/es:
LEONARDI, D; COTIGNOLA, J; PECCI, A; VAZQUEZ, E
Lugar:
mar del Plata
Reunión:
Congreso; LVIII Reunion Anual de SAIC,; 2013
Institución organizadora:
SAIC
Resumen:
El tratamiento del cáncer de próstata (CaP) refractario a hormonas (HRPC) con glucocorticoides (GC) produce beneficios, parcialmente debido a la inhibición de la síntesisde andrógenos por la glándula adrenal. Pero, su mecanismo de acción no se conoce claramente. Por el contrario, algunos trabajos revelaron que los GC mantendrían la viabilidad de las células del HRPC, sugiriendo que contribuirían a la progresión de dependencia a independencia hormonal. Nuestro objetivo es estudiar la señalización del receptor de GC (GR) en líneas celulares de CaP.Se analizó el efecto de distintas concentraciones del GCsintético dexametasona (Dex) sobre la viabilidad de células PC3 y LNCaP, mediante el ensayo de MTS.Dexno modificó la viabilidad celular. Mediante RT-qPCRanalizamos la expresión de GR y de IkB(blanco transcripcional directo).Dexno alteró el nivel de GR pero indujola expresión deIkB en LNCaP, probablemente debido a la activación del receptor.En PC3,la máxima expresión de GR se detectó a las 6 h por RT-qPCRy por Western Blot. Con el objetivo de analizar la expresión ectópica de GR, las células PC3 se transfectaron con el plásmido de expresión pRSV-GR o su control pRSV-gal. Los niveles del ARNmde GR se incrementaron 6 veces respecto al control. Además, para analizar la actividad transcripcional de GR, las células PC3 se transfectaroncon el plásmido MMTV-luc, que posee 3 sitios de unión para GRrío arriba del gen de la luciferasa. Se analizó el efecto de la generación de un estado anti-inflamatorio por tratamiento con hemina. Se observó que la Dex indujo la actividad de luciferasa en todas las condiciones experimentales ensayadas respecto a los controles. El tratamiento con hemina redujo significativamente tantola actividad de GR inducida por Dex como la actividadbasal del receptor. En conclusión, comprobamos diferencias en la expresión y comportamiento del GR en células de PCa en respuesta a Dex.
