El estrés mecánico induce la expresión de tnf alfa en células epiteliales mamarias en cultivo con características de diferenciación lactogénica.

ROMAROWSKI ANA; KORDON EDITH CLAUDIA; QUAGLINO ANA

Mar del Plata

Congreso; LVI Reunión Cientifica Anual SAIC; 2011

SAIC

En la mama, el destete genera la producción de factores locales que median la apoptosis masiva del epitelio secretorio post-lactancia. Se ha postulado que el estrés mecánico (EM), resultante de la acumulación de leche, podría estar involucrado en la inducción temprana de estos factores. Para probar esta hipótesis, utilizamos un dispositivo diseñado y validado en nuestro laboratorio que permite ejercer EM a células creciendo en cultivo sobre una membrana flexible. Previamente reportamos que el EM aplicado a células epiteliales mamarias (HC11) induce la expresión de c-fos, la expresión y secreción de LIF y la fosforilación de STAT3, ERK1/2 y JNK. Nuestros resultados actuales muestran que el EM induce, en las mismas condiciones, la expresión de tnf-α a nivel de ARNm, analizado por RT-PCR cuantitativa. Además, usando inhibidores farmacológicos, determinamos que la quinasa ERK1/2 mediaría la inducción de c-fos, pero no la de tnf-α, en la cual estaría involucrada la vía de JNK. Por otro lado, para lograr que nuestro modelo se asemeje más a lo que sucede in vivo, donde las células epiteliales mamarias reciben el EM estando completamente diferenciadas, se trataron células HC11 crecidas sobre membranas flexibles con hormonas lactogénicas (HL). Observamos que, aún en ausencia de HL, las HC11 creciendo sobre el sustrato flexible presentan niveles detectables de pSTAT5a (por Western blot) y β-caseína (RT-PCR semi-cuantitativa), marcadores de diferenciación mamaria. Este efecto a nivel bioquímico, correlacionó, a nivel morfológico, con estructuras y disposiciones celulares en 2 y 3 dimensiones, características de células mamarias bien diferenciadas. En conclusión, nuestros resultados muestran que en células mamarias HC11 con algunas características de diferenciación lactogénica, el EM es capaz de inducir la expresión del ligando de muerte TNF-alfa, sugiriendo que el estiramiento sería capaz de generar respuestas similares en las células de mamas in vivo luego del destete.