Control de la apoptosis por glucocorticoides en células de epitelio mamario HC11 diferenciadas. Relevancia de la expresión de p21CIP1

STORTZ, M.; ROCHA-VIEGAS, L.; PRESMAN, D.; PECCI, A.

Mar del Plata

Congreso; LVI Reunión Científica Anual Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2011

Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC)

Los glucocorticoides (GC) retardan la apoptosis en glándula mamaria post-lactancia mediante el control de la expresión de genes como p21CIP1 (p21) y bcl-X. Los GC inducen la expresión de la isoforma antiapoptótica Bcl-XL independientemente del grado de diferenciación del epitelio mamario. Sin embargo, inducen a p21 en células proliferando (preñez) y lo reprimen en células diferenciadas (lactancia). La represión de p21 correlaciona con la prevención de la apoptosis que ejercen los GC en la involución mamaria post-lactancia. Diversos estudios asociaron un cambio en la localización subcelular de p21 con su papel en la apoptosis en otros tipos celulares. El objetivo de este trabajo fue determinar el perfil de expresión de p21, compararlo con el de Bcl-XL y analizar la relevancia de p21 en el control de la apoptosis por GC. Se utilizó la línea celular de epitelio mamario murino HC11 y se analizó la expresión de p21 y bcl-XL por RT-qPCR. Mediante el uso de la línea estable HC11-p21, que expresa la proteína de fusión p21-GFP de manera inducible se estudió la localización subcelular de p21 a lo largo de la diferenciación y su funcionalidad en la prevención de la apoptosis por GCs. En células diferenciadas inducidas a apoptosis por remoción de hormonas lactogénicas, la dexametasona (DEX) produce un aumento significativo en los niveles de ARNm de bcl-XL, correlacionando éste con la represión de p21 y con un descenso de la actividad de Caspasa-3. La sobreexpresión de p21 inhibe la prevención de la apoptosis que ejerce DEX en células diferenciadas; sin embargo per se, no afecta la actividad de Caspasa-3 (control: 1; DEX: 0.6±0.2; p21: 0.8±0.1; p21+DEX: 0.9±0.2). Por microscopía confocal se observó que la distribución subcelular de p21-GFP (preferentemente nuclear) no cambia con la diferenciación ni con el tratamiento hormonal. Se concluye que la represión de p21 sería necesaria para el efecto antiapoptótico de los GC en células epiteliales mamarias diferenciadas.