“Efecto de Secuestrantes de ROS en la Terapia Fotodinámica de células de Adenocarcinoma de Pulmón”.

TEIJO J; DIEZ, B; BATLLE A; FUKUDA H

Instituto Roffo, Buenos Aires, Argentina

Jornada; XXIV JORNADAS NACIONALES DE ONCOLOGIA DEL INSTITUTO "ANGEL H. ROFFO"; 2009

nstituto Angel H Roffo

Secuestrantes de ROS en la Terapia Fotodinámica de células de Adenocarcinoma de Pulmón. La terapia fotodinámica del cáncer (TFD) presenta una amplia aplicación en el tratamiento de tumores superficiales, obstructivos y recientemente, en cáncer de pulmón. Se administra un fotosensibilizante (FS), que se acumula preferencialmente en las células tumorales, y se irradia con una longitud de onda particular para cada FS. Las porfirinas son los únicos FSs sintetizados endógenamente por incubación con ácido aminolevulínico (ALA). La producción de especies reactivas de oxígeno (ROS) es uno de los factores determinantes en la inducción temprana de la muerte celular. Se determinó el grado de protección (GP) de distintos secuestrantes de ROS (GSH, Manitol, Triptofano y Ascorbato) en la TFD de células de adenocarcinoma de pulmón (GP: relación % de supervivencia post-TFD en presencia del secuestrante vs. porcentaje de supervivencia post-TFD en ausencia del secuestrante). Se analizó también el efecto de los secuestrantes en la inducción de muerte celular mediante el conteo de células viables y apoptóticas por tinción con naranja de acridina y bromuro de etidio. Se preincubaron células de la línea A549 durante 1h con distintas concentraciones de secuestrantes a fin de  determinar citotoxicidad y fotoactividad per se de los secuestrantes. Luego se agregó ALA 1mM, se incubó 3hs y se irradió entre 5 y 10 minutos para determinar porcentaje de supervivencia post-TFD y GP. A las 2hs se realizó el ensayo de MTT y la tinción para apoptosis. Se seleccionó la concentración de secuestrante no tóxica que presentó mayor GP (GSH: 1mM, GP:2,1±0,3; Manitol: 10mM, GP:1,1±0,1; Triptofano:1mM, GP:1,7±0,1; Ascorbato: 1mM, GP:2,6±0,1). A esas concentraciones se observó un aumento en la viabilidad luego de la TFD. El ascorbato mostró la mayor protección (%Apoptosis post-TFD 7 min: 16,3±1,3% vs. 65,8±23,7%; %Apoptosis post-TFD 10 min: 48,3±2,7% vs. 98,4±3,5%; con y sin ascorbato respectivamente) Los demás compuestos no fueron efectivos a 7 min pero sí a 10 min de irradiación. (%Apoptosis post-TFD con secuestrantes: Triptofano: 74,6±2,6%; Manitol: 64,3±1,6%; GSH: 74,9±3,1%). Estos resultados apoyan la gran participación de las ROS en la inducción de muerte celular temprana post-TFD y constituyen  una herramienta para minimizar el fotodaño en los tejidos no tumorales.