Inactivación de células leucémicas humanas k562 mediante la fotosensibilización de una antraquinona natural

MARÍA LAURA MUGAS,TAMARA JEREZ PELLEGRINO, MARIELA CÉSPEDES , GUSTAVO CALVO, DANIEL SÁENZ , GABRIELA DI VENOSA, ADRIANA CASAS .; SUSANA NUÑEZ MONTOYA

Bariloche

Congreso; IV Grafob.; 2018

Grupo Argentino de Fotobiología

Parietina (PT), una antraquinona (AQ) purificada del liquen Teloschistes flavicans (Sw.) Norm, ha demostrado ser un buen fotosensibilizador (FS) con aplicaciones promisorias en fotoinactivación bacteriana1. El objetivo del presente trabajo fue evaluar la actividad de PT como fotosensibilizador sobre células leucémicas humanas K562 in vitro; a fin de estimar su potencial uso en la Terapia Fotodinámica del cáncer (TFD).La pureza de PT (1,8-dihidroxi-3-metoxi-6-metilantraquinona) se determinó mediante HPLC. Las células K562 se emplearon en estado de semiconfluencia, y fueron expuestas a diferentes concentraciones de PT (RPMI con DMSO ≤ 1%). Se realizaron ensayos de toxicidad (sin luz) con 24 h de exposición a PT, para determinar la Concentración Inhibitoria 50 (CI50) y la Máxima Concentración No Citotóxica2 (MCNC) en oscuridad. La MCNC y MCNC/2 fueron las concentraciones utilizadas para evaluar la foto-inactivación. Después de incubar las células con las 2 concentraciones de PT (37 °C, 24 h), se procedió a la irradiación con distintas dosis de energía, variando los tiempos de exposición a la luz (0 a 90 min). Como fuentes de irradiación se utilizaron: una lámpara actínica (Philips TL 20W/03 RS, 20 W) y 2 lámparas azules bajo consumo (Sica, 15 W). Luego de la irradiación, se incubó 19 h para evaluar el fotodaño, cuantificando la viabilidad por MTT3. Se determinó la dosis de luz que produce el 50 % de muerte celular (dosis letal lumínica 50, DL50) en presencia de PT.PT (pureza de 91,2 ± 0,2 %) presentó una CI50=21 μM en la línea celular K562, y una MCNC=10 μM. Los espectros de emisión de los sistemas de irradiación evidenciaron que la lámpara actínica emite en el rango de 380-480 nm, mientras que la lámpara azul emite de los 400-500 nm. Además, se determinó que la máxima exposición de estas células a la luz sin provocar toxicidad per se fue de 15 min (actínica, potencia 1,18 mW/cm2) y 90 min (azul, potencia 4,72 mW/cm2). Con luz actínica no se observó fotoinactivación significativa a los tiempos empleados, mientras que con la azul, la DL50 fue 11,32 J/cm2 (40 min), empleando PT a 10 μM. Por lo cual, esta AQ demostró inducir foto-destrucción de las células leucémicas, a concentraciones que no son tóxicas en condiciones de oscuridad.Los resultados de este trabajo confirman el potencial uso de parietina en TFD, apoyando las recomendaciones de la OMS de revalorizar la Fitomedicina y considerar las propiedades curativas de la flora del país. Actualmente, continuamos estudiando la fotosensibilización mediada por PT sobre líneas de tumores sólidos, así como en células normales.