Efecto fotodinámico de porfirinas sintetizadas a partir del ácido 5-aminolevúlico sobre cultivos celulares

FUKUDA, HAYDÉE; ALVAREZ, GABRIELA; LACELLI, MARÍA; BATLLE, ALCIRA; RIVAROLA, VIVIANA

Departamento de Química Biológica, FCEyN, UBA

Jornada; VI Jornadas Departamentales; 2007

Departamento de Química Biológica, FCEyN, UBA

La terapia fotodinámica (TFD) es una modalidad terapéutica en el tratamiento de neoplasias que involucra el pre-tratamiento del tejido maligno con un fotosensibilizador (FS), el cual causa después de la exposición a la luz, la liberación de radicales libres y especies reactivas de oxígeno, resultando en el fotodaño y la consecuente destrucción del tumor. El ácido 5 aminolevúlico (ALA) es el precursor biológico del FS protoporfirina IX (PPIX) en el camino de la biosíntesis del hemo. ALA-TFD se utiliza no sólo con fines terapéuticos sino también para diagnóstico, aprovechando la fluorescencia de las porfirinas, y actualmente se está aplicando en urología, gastroenterología y dermatología. El objetivo de este trabajo fue evaluar los efectos fotodinámicos de ALA-PPIX sobre cultivos de células de adenocarcinoma mamario humano (MCF-7c3) y de laringocarcinoma humano (Hep-2). Mediante el ensayo de MTT se observó que  ALA es inocuo en la oscuridad en ambas líneas celulares hasta la concentración 1mM y 24 horas de incubación y las porfirinas sintetizadas se acumulan de manera proporcional a la concentración y al tiempo de incubación, llegando a la saturación a las 5 horas en ambas líneas celulares. (1mM =3.2 y 8 mg porf/106 células en Hep-2 y MCF-7c3 respectivamente). Los estudios de localización celular demostraron que en las células MCF-7c3 la fluorescencia de las porfirinas se concentra tanto en el citoplasma como en el núcleo, y en las células Hep-2 en el área perinuclear probablemente en los lisosomas. Los ensayos de índice de supervivencia por MTT indican que la acción combinada de ALA-PPIX (1mM) y la luz visible (54 Jcm-2) induce una disminución significativa de la viabilidad en células MCF-7c3 y en las células Hep-2 (90% y 40% respectivamente). Por tinción con Hoechst 33258 de los cultivos celulares tratados con ALA-PPIX (1mM) se encontró que una irradiación de 54 Jcm-2 induce el valor máximo de índice necrótico (73%) en células MCF-7c3 y un valor máximo apoptótico (34%) en células Hep-2. Estos resultados fueron confirmados por el ensayo TUNEL. Los estudios indican la aplicabilidad de ALA-PPIX como agente fototerapéutico para la inactivación de células tumorales mediante TFD.