Uso de dendrímeros de ALA en el tratamiento fotodinámico del cáncer y lesiones ateroscleróticas

RODRIGUEZ L; DI VENOSA G; CANCELADA L; MAMONE L; GANDARA L; BATLLE A; CASAS A

Buenos Aires

Congreso; 14° Congreso de Medicina Interna del Hospital de Clínicas; 2012

Hospital de Clínicas Gral José de San Martín

La Terapia Fotodinámica (TFD) es un tratamiento antitumoral que consiste en la administración de un fotosensibilizante que se localiza selectivamente en el tumor. Mediante la iluminación de la zona tumoral con una longitud de onda tal que active al fotosensibilizante, se desencadena una serie de reacciones mediada por radicales libres que induce la muerte de las células tumorales. Nuestro grupo se ha especializado en la fotosensibilización endógena con las porfirinas biosintetizadas a partir del precursor ácido 5-aminolevúlico (ALA). Otro de los usos emergentes de la Terapia Fotodinámica es la denominada Fotoangioplasía, que consiste en la TFD de lesiones ateroscleróticas. La placa aterosclerótica está formada principalmente macrófagos, linfocitos T y células de músculo liso. Dado que el ALA es una molécula hidrofílica, su incorporación a la célula podría incrementarse mediante la modificación con sustituyentes que aumenten su lipofilicidad. Con el fin de optimizar la TFD hemos diseñado una serie de dendrímerosconteniendo ALA. La captación de dendrímeros por los macrófagos del sistema retículoendotelial ha sido vista principalmente como un hecho a evitar en la TFD del cáncer, ya que los mismos secuestran moléculas que deberían ser dirigidas a la zona tumoral.La idea de este trabajo es la de aprovechar esta propiedad para atacar selectivamente las placas ateromatosas mediante fotosensibilización de sus componentes macrofágicos, dejando las estructuras vasculares intactas.El objetivo inmediato fue el de estudiar dos dendrímeros de ALA, para facilitar su incorporación a células tumorales y mejorar la eficiencia de la TFD del cáncer, y además estudiar la captación de dichos dendrímeros en macrófagos y células endoteliales, y su respuesta a la fotosensibilización, como modelo de fotoangioplastía.Se emplearon dendrímeros de ALA conteniendo 6 moléculas de ALA (6m-ALA) ó 9 (9m-ALA) que fueron sintetizados en University College London, Reino Unido.Para evaluar la efectividad de la TFD antitumoral, se analizó la síntesis de porfirinas in vitro, utilizando la línea de adenocarcinoma murino LM3 por medio de extracción química y cuantificación fluorométrica.Como modelo de fotoangioplastía se emplearon macrófágos Raw 264.7 que se expusieron a los dendrímeros durante tiempos de 3 y 24 hs. Paralelamente, como modelo de epitelio vascular, usamos células de microendotelio vascular inmortalizadas HMEC-1. Encontramos que tanto para la línea LM3, HMEC-1 y Raw 264.7, la liberación de ALA y síntesis de porfrinas a partir de los dendrímeros 6m-ALA y 9m-ALA es total a las 24 hs de incubación, mientras que a las 3 hs, la liberación es parcial, lo cual coincide con el uso de un sistema de liberación lenta como son los dendrímeros. Por otra parte, la síntesis de porfirinas es mayor a las 3 hs en la línea macrofágica (6m-ALA= 52 ± 6 μg porfirinas/105 cél, 9m-ALA= 59 ± 7 μg porf./105 cél) respecto a la línea endotelial HMEC-1 (6m-ALA= 28 ± 3 μg porf./105 cél, 9m-ALA= 27 ± 2 μg porf./105 cél) empleando ALA 0,2 mM (p< 0,01), demostrando la selectividad de los dendrímeros por los macrófagos.En células tumorales LM3, la síntesis de porfirinas a partir de los dendrímeros es mucho mayor que a partir de ALA (ALA= 48 ± 6 μg porf./105 cél, 6m-ALA= 168 ± 19 μg porf./105 cél, 9m-ALA= 176 ± 20 μg porf./105 cél) a las 3 hs con ALA 0,025 mM, demostrando que los dendrímeros de ALA son más eficaces que el ALA para su uso en la TFD del cáncer.Conclusiones: Los dendrímeros del ALA son promisorios en la TFD del cáncer ya que inducen una mayor acumulación de fotosensibilizante a menores concentraciones, en células tumorales. También lo serían en el tratamiento de fotoangioplastía ya que los mismos demostraron in vitro tener selectividad por el componente macrofágico de la placa ateromatosa, en comparación con el endotelio vascular