CIPYP   05508
CENTRO DE INVESTIGACIONES SOBRE PORFIRINAS Y PORFIRIAS
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
TERAPIA FOTODINÁMICA CON PORFIRINAS ENDÓGENAS EN CÉLULAS DE ADENOCARCINOMA DE PULMÓN HUMANAS Y MURINAS
Autor/es:
CASSINELLI, J; TEIJO MJ,; BATLLE A,; FUKUDA H.
Lugar:
CABA
Reunión:
Jornada; XXVIII JORNADAS MULTIDISCIPLINARIAS DE ONCOLOGIA DEL INSTITUTO “ÁNGEL H. ROFFO; 2012
Institución organizadora:
INSTITUTO “ÁNGEL H. ROFFO
Resumen:
Resumen: La terapia fotodinámica del cáncer (TFD) presenta una amplia aplicación en el tratamiento de tumores superficiales, obstructivos y recientemente, en cáncer de pulmón. Consiste en la administración de un fotosensibilizante (FS) que se acumula preferencialmente en las células tumorales. Posteriormente, la  irradiación con una longitud de onda específica para cada FS provoca reacciones fotoquímicas que conllevan a la muerte celular. Las porfirinas son los únicos FS sintetizados endógenamente mediante la administración de su precursor biológico, el ácido 5-aminolevúlico (ALA). En el presente trabajo se determinaron las condiciones óptimas para aplicar la TFD en células de adenocarcinoma de pulmón murinas (LP07, Instituto AHRoffo ) y humanas (A549) para su posterior comparación. Las células se incubaron con ALA bajo diferentes condiciones experimentales, se cuantificaron las porfirinas intracelulares espectrofluorométricamente  y luego se iluminaron con un banco de dos tubos fluorescentes.  Se determinó la citotoxicidad del ALA en oscuridad y la viabilidad post TFD para ambas líneas mediante el ensayo de MTT. El ALA no resultó citotóxico en una incubación de 3 h para ninguna de las dos líneas, mientras que en una incubación de 24 h se observó un aumento de la toxicidad a partir de una concentración de 10 mM para las A549 y a partir de 5 mM para las LP07. En ambos casos la concentración de 10 mM resultó más tóxica que 20 mM. Al incubar las células LP07 con distintas concentraciones de ALA (0,05 a 5mM) durante distintos tiempos (1 a 5 h), se obtuvo un plateau en la síntesis de porfirinas en la concentración 0,5 mM independientemente del tiempo de incubación (12,8 ± 0,2 ng porfirinas/105 céls. Para 3 h de incubación). Con un tiempo de incubación de 3 h, ambas líneas alcanzan un plateau a una concentración de ALA 0,5 mM, y para todas las concentraciones ensayadas, las células A549 presentan mayor acumulación de porfirinas intracelulares (23,7 ± 0,6 ng porfirinas/105 céls.). De manera similar la cinética de acumulación de porfirinas muestra un incremento en la síntesis conforme aumenta el tiempo de incubación (0,5 a 6 h) para ambas líneas. Nuevamente los resultados reflejan una mayor síntesis en las células A549 que en las LP07 para todos los tiempos ensayados (6 h incubación, A549: 107,1 ± 1,6  ng porfirinas/105 céls, LP07: 24,1 ± 0,3 ng porfirinas/105 céls.) Al aplicar la TFD en ambas líneas en iguales condiciones utilizando una concentración de ALA 1 mM y una incubación de 3 h, se observó mayor supervivencia celular en todos los tiempos de irradiación para las células LP07. Se determinó una dosis letal 50 (DL50 : tiempo de irradiación en el cual se obtiene una viabilidad celular del 50% 1 h post TFD) de 7 minutos para las células A549 y de 10 minutos para las células LP07. Estos resultados sugieren que las células LP07 son menos eficientes que las A549 en la síntesis de porfirinas, lo cual puede contribuir a la mayor supervivencia post TFD observada. Estas células representan un modelo interesante para estudios comparativos