CIPYP   05508
CENTRO DE INVESTIGACIONES SOBRE PORFIRINAS Y PORFIRIAS
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Efecto de ciprofloxacina en concentraciones subinhibitorias sobre la biopelícula de Staphylococcus aureus
Autor/es:
DOTO C.; GÁNDARA L; ALVAREZ L.; CASAS A; BUZZOLA F
Lugar:
Buenos Aires
Reunión:
Congreso; VII Congreso de la Sociedad Argentina de Bacteriología, Micología y Parasitología Clínicas - SADEBAC 2012; 2012
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Bacteriología, Micología y Parasitología Clínicas
Resumen:
a) Objetivos: La
exposición de Staphylococcus aureus a
concentraciones subinhibitorias (subCIM) de ciertos antibióticos gatilla en
este patógeno cambios en la expresión de algunos factores de virulencia.
En este contexto, el objetivo del presente trabajo es estudiar el efecto que
la ciprofloxacina (CPX) en subCIM tiene sobre la formación
de biopelícula y patrón transcripcional de genes regulatorios
(RNAIII, sae) y de
virulencia (sdrC, icaA, icaR).
b) Materiales y
Métodos: Se utilizaron las siguientes cepas de S. aureus: Newman (SAMS), HU71 (SAMR) y Mu50 (VISA). Para
cada una de las cepas, se determinó la
CIM a CPX en medio líquido siguiendo la metodología
estándar. La formación de biopelícula se realizó en microplacas y se cuantificó
midiendo la DO595
luego de la fijación y tinción con cristial violeta. Se determinó el nivel
de transcriptos luego de la extracción del ARN total de las biopelículas y
posterior PCR en tiempo real (qRT-PCR) con los cebadores específicos.
c) Resultados: La
formación de biopelícula aumentó luego de tratar a la cepa SAMS a subCIM
de CPX (DO: 2.52 ± 0.1 vs 3.41 ± 0.17, p ≤ 0.01). Por el contrario, luego de la
exposición a subCIM de CPX se observó una reducción significativa de
la biopelícula de la cepa VISA (DO: 2.46 ± 0.11 vs 1.98 ± 0.12 , p ≤
0.05). Sin embargo, no se determinaron cambios para la biopelícula de la cepa
SAMR en presencia de subCIM de CPX (DO: 2.81 ± 0.12 vs 2.93 ± 0.19).
Previamente, se estableció para la cepa SAMS que el incremento de
biopelícula inducido por subCIM de CPX sería por un mecanismo ica-independiente. En el presente
trabajo, se observó niveles muy superiores del transcripto icaR (2(-ddCT): 4.54)
(represor los locus ica) en la
biopelícula formada en presencia de subCIM de CPX y niveles similares de
ARNm para icaA (2(-ddCT):
1.16). Interesantemente, el nivel del transcripto sdrC (adhesina) se halló muy incrementado
(2(-ddCT): 28.34) en la biopelícula formada en presencia de subCIM
de CPX. Además, los transcriptos de los reguladores RNAIII (2(-ddCT):
1.88) y sae (2(-ddCT):
3.82) se observaron elevados por el tratamiento con CPX.
d) Conclusiones:
Concentraciones subinhibitorias de ciprofloxacina tienen efectos
diferentes sobre la formación de la biopelícula de S. aureus. Probablemente estas diferencias sean específicas
de las cepas bacterianas. El incremento de biopelícula de la cepa SAMS
sería un reflejo de cambios en el nivel de ARNm de genes reguladores y de
virulencia.