Potenciación de la Terapia Fotodinámica con el flavonoide natural silibina en células de vejiga

GANDARA, LAUTARO; RODRÍGUEZ, LORENA; SANDES, E.; DI VENOSA, GABRIELA; MAMONE, LEANDRO; BATLLE, ALCIRA; CASAS, ADRIANA; EIJÁN, ANA MARIA

Buenos Aires

Jornada; XXVI Jornadas de Oncología Instituto AH Roffo; 2010

INSTITUTO “ÁNGEL H. ROFFO”

La Terapia Fotodinámica (TFD) es un tratamiento antitumoral que consiste en  la administración de un fotosensibilizante (FS) que se localiza selectivamente en el tumor.  Mediante la iluminación de la zona tumoral con una longitud de onda tal que active al FS, se desencadena una serie de reacciones mediada por radicales libres que induce la muerte de las células tumorales.  Nuestro grupo se ha especializado en la fotosensibilización con el FS endógeno Protoporfirina IX, biosintetizado a partir de su precursor ácido 5-aminolevúlico (ALA), lo que se conoce como ALA-PDT.  La TFD en cáncer de vejiga resulta de particular interés debido al fácil acceso a la  zona tumoral, que permite la instilación del pro-fotosensibilizante y el acceso endoscópico de una fibra óptica con un láser, para la irradiación. La silibina, flavonoide natural extraído de Silybum marianum, se usa actualmente como hepatoprotector. Sin embargo se ha encontrado que también posee actividad antitumoral, mediante la regulación diversas vías de señalización intracelular.  En trabajos anteriores hemos encontrado que la silibina inhibe el crecimiento de células de vejiga, y aumenta la eficacia de la inmunoterapia con el Bacilo Calmette-Guerín y de la radioterapia. En el presente trabajo evaluamos la actividad del tratamiento combinado de ALA-TFD con silibina sobre líneas celulares de cáncer de vejiga humanas (T24) y murinas (MB49). Las células se expusieron a diferentes dosis lumínicas (expresadas en Joules/cm2) de manera de obtener el 50% de muerte celular (DL50, dosis lumínica 50). A las 19 hs se evaluó el porcentaje de muerte celular mediante el método del MTT. La línea T24 es más sensible a la ALA-PDT que las MB49, siendo las DL50 de 0,025 y 0,05 J/cm2 respectivamente. El tratamiento combinado se realiza irradiando con la DL50 células que fueron tratadas 24 hs antes con silibina (30 ó 50 μM). En la línea MB49 silibina 50 μM y 30 μM induce 37% y 24% de citotoxicidad respectivamente. La combinación con ALA-PDT potencia la muerte en un 25% y 13% respectivamente. Resultados de similar magnitud se encontraron en la línea  T24. Ya que dosis no tóxicas de silibina no potencian el efecto fotodinámico y que el tratamiento combinado con dosis toxicas de silibina no es sinérgico sino prácticamente aditivo podemos concluir que las vías de acción de ambas modalidades terapéuticas no serían compartidas, y que el efecto neto se debería a la suma de las toxicidades de ambos tratamientos.  Aunque son necesarios más estudios para evaluar las vías de citotoxidad involucradas, estos resultados sugieren que la adición de silibina a la ALA-PDT aumentaría la eficacia de la TFD.