MUTACIONES HETEROCIGOTAS EN EL GEN IGFALS EN NIÑOS CON TALLA BAJA IDIOPÁTICA (TBI): IMPACTO SOBRE LA ESTATURA Y EL SISTEMA DE LOS IGFs.

DOMENÉ HM; SCAGLIA PA; MARTÍNEZ AS; KESELMAN AC; PIPMAN VR; BENGOLEA SV; KARABATAS LM; GUIDA MC; ROPELATO MG; BALLERINI MG; LESCANO EM; BLANCO MA; REY RA; HEINRICH JJ; JASPER HG

Buenos Aires, Argentina

Congreso; XVI Congreso de La Sociedad Argentina de Endocrinología y Metabolismo; 2009

Sociedad Argentina de Endocrinología y Metabolismo

HETEROCIGOSIS PARA MUTACIONES EN EL GEN IGFALS EN NINOS CON TALLA BAJA IDIOPATICA (TBI): IMPACTO SOBRE LA TALLA Y EL SISTEMA DE LOS IGFS. Introduccion y Objetivos: La deficiencia de la subunidad acido-labil (ALS), causada por mutaciones inactivantes del gen IGFALS, se caracteriza por moderado retardo de crecimiento asociado con marcada reduccion de los niveles de IGF-I e IGFBP-3. Familiares de estos pacientes, portadores de mutaciones en heterocigosis, presentan frecuentemente estatura mas baja que los familiares sin mutaciones. Considerando que un porcentaje de ninos con TBI presentan niveles bajos de IGF-I, es probable que un subgrupo de ellos puedan presentar mutaciones en el gen IGFALS. El objetivo de este estudio fue caracterizar mutaciones en el gen IGFALS en un grupo de pacientes con TBI y determinar el impacto de estas mutaciones sobre la talla y los niveles de IGF-I, IGFBP-3 y ALS. Introduccion y Objetivos: La deficiencia de la subunidad acido-labil (ALS), causada por mutaciones inactivantes del gen IGFALS, se caracteriza por moderado retardo de crecimiento asociado con marcada reduccion de los niveles de IGF-I e IGFBP-3. Familiares de estos pacientes, portadores de mutaciones en heterocigosis, presentan frecuentemente estatura mas baja que los familiares sin mutaciones. Considerando que un porcentaje de ninos con TBI presentan niveles bajos de IGF-I, es probable que un subgrupo de ellos puedan presentar mutaciones en el gen IGFALS. El objetivo de este estudio fue caracterizar mutaciones en el gen IGFALS en un grupo de pacientes con TBI y determinar el impacto de estas mutaciones sobre la talla y los niveles de IGF-I, IGFBP-3 y ALS. Sujetos y Metodos: Se seleccionaron 50 ninos normales con ALS <0.5 SDS de un total de 200 ninos normales (edades 5.0-16.3 anos) y 89 ninos con TBI (1.8-16.9 anos, talla -1.92 a -4.79 SDS, GH maxima a estimulo con arginina-clonidina >6.0 ng/ml). Se determinaron los niveles de IGF-I (RIA), IGFBP-3 (IRMA) y ALS (RIA). Los niveles se expresaron en SDS de acuerdo a edad y estadio puberal. Se determino la secuencia del gen IGFALS en muestras de ADN genomico por amplificacion por PCR seguida de secuenciacion por electroforesis capilar. El efecto de las mutaciones con cambio de sentido se evaluo in silico (PolyPhen, EMBL- Harvard University) clAsificandose las mutaciones como severas y no severas. Resultados: Algunos ninos con TBI presentaron niveles bajos (<-2.0 SDS) de IGF-I (31%), IGFBP-3 (16%) y ALS (27%). Se encontraron variantes geneticas del gen IGFALS en heterocigosis (HT) en 11/89 ninos TBI (12.3%); 9 no sinonimos en 8 pacientes (E35GfsX17, G83S, L97F, R277H, P287L, A330D, R493H, A546V y R548W) y 4 sinonimos en 3 pacientes (P73P, L271L, L316L y T522T), como asi tambien en 5/50 ninos normales (V239M, N276S, R277H y L487L). Se extendio el estudio a padres y hermanos de los pacientes con mutaciones: 15 padres (7 HT) y 14 hermanos (2 HT). Talla y niveles de IGFs en pacientes TBI y familiares con y sin mutaciones en el gen IGFALS: Talla y niveles de IGFs en pacientes TBI y familiares con y sin mutaciones en el gen IGFALS:   Mutados No mutados Test t Talla (SDS) -2.16±1.07 (20) -0.30±0.92 (20) P<0.0001 IGF-I (SDS) -1.58±1.53 (19) -0.46±1.03 (20) P=0.0107 IGFBP-3 (SDS) -1.45±1.28 (20)  0.18±1.11 (20) P=0.0001 ALS (SDS) -1.91±1.62 (18) -0.99±1.01 (19) P=0.046 Diferencias según la severidad de la mutación:   Mutaciones severas Mutaciones no severas No mutados ANOVA de una vía + Tukey Talla (SDS) -2.09±1.40 (8)a -2.26±0.83 (12)a -0.30±0.92 (20) P<0.0001 IGF-I (SDS) -2.38±1.63 (8)b,c -0.99±1.21 (11) -0.46±1.03 (20) p=0.0024 IGFBP-3 (SDS) -1.90±1.28 (8)a -1.14±1.24 (11)d  0.18±1.11 (20) p=0.0003 ALS (SDS) -3.22±1.34 (7)a,e -1.07±1.19 (11) -0.99±1.01 (20) P=0.0002 ap<0.001 vs no mutados; bp<0.01 vs no mutados; cp<0.05 vs no severas; dp<0.05 vs no mutados; ep<0.001 vs no severas. La talla y los niveles de IGF-I, IGFBP-3 y ALS fueron significativamente mas bajos en los pacientes con mutaciones comparados con sus familiares no mutados. Los portadores TBI con mutaciones severas presentaron niveles de ALS significativamente mas bajos que aquellos con mutaciones no severas. La talla y los niveles de IGF-I, IGFBP-3 y ALS fueron significativamente mas bajos en los pacientes con mutaciones comparados con sus familiares no mutados. Los portadores TBI con mutaciones severas presentaron niveles de ALS significativamente mas bajos que aquellos con mutaciones no severas. Conclusiones: En familias con TBI, el hallazgo de niveles de IGF-I, IGFBP-3, ALS y talla mas bajos en portadores heterocigotos de mutaciones en el gen IGFALS que en familiares no portadores, sugiere un efecto de dosis genica e indicaria que ambos alelos del gen son requeridos para expresar niveles maximos de ALS, que estabilicen los niveles circulantes de IGF-I e IGFBP-3, y alcanzar el maximo potencial del crecimiento. Mutaciones en heterocigosis en el gen IGFALS podrian explicar la etiologia de un subgrupo de ninos con TBI, especialmente en aquellos con bajos niveles de IGFs. El hallazgo de mutaciones en heterocigocis en ninos normales explicaria la aparicion de pacientes deficientes de ALS en familias no consanguineas.