LA DEGRADACIÓN MITOCONDRIAL DE INSULINA REGULA SU

CAMBEROS M; PASSICOT GA; CAO G; MARTUCCI L; CRESTO JC

2-4 de Diciembre, Ciudad Autónoma de Buenos Aires

Jornada; XI Jornadas Anuales de la Soc. de Biología; 2009

Sociedad Argentina de Biología

Objetivos-Determinar si la degradación forma parte del transporte mitocondrial de insulina. Métodos-La enzima degradante de insulina (EDI) se obtuvo de músculo de rata por sucesivos pasos cromatográ-ficos. La degradación (filtración en Sephadex G50 o precipitación con TCA 5%) fue estudiada a 37ºC, 30ºC y 25ºC en mitocondrias hepáti-cas aisladas. Las mitocondrias fueron recuperadas con 100% de oxí-geno y estudiadas con 1 ng/tubo de insulina y 105 c/m de 125I-insulina. Para los estudios con microscopía confocal las mitocondrias fueron incubadas con anticuerpos  específicos para insulina y EDI. Resulta-dos- La microscopía confocal demostró  que EDI incrementa el trans-porte de insulina. A 25ºC la degradación de insulina está disminuida y EDI induce su acumulación mitocondrial. A 30ºC la acumulación mi-tocondrial es menos visible y la degradación es casi instantánea. Estu-dios dosis/respuesta con cantidades crecientes  de insulina (1 ng a 10 µg) mostraron que altas dosis de insulina saturan parcialmente el sistema (transporte y degradación). N-ethilmaleimida 0,1 mM incre-mentó la internalización mitocondrial (mitocondrias, control: NS, EDI: P<0.00005; mitoplastos, control: P<0.02, EDI: P<0.002) e inhi-bió parcialmente la degradación de insulina. Conclusiones- La dismi-nución de la degradación mitocondrial de insulina se acompaña de un incremento en su transporte.