Evaluacion de los niveles sericos de la proteina de union de alta afinidad de la hormona de crecimiento humana (GHBP) y del polimorfismo del exon 3 del gen del receptor de GH en niños con talla baja idiopatica

BALLERINI, M.G.; SCAGLIA, P; DOMENÉ, H.; MARTÍNEZ, A.; KESELMAN, A.; PIPMAN, V.; BENGOLEA, S.; CASSINELLI, H.; KARABATAS, L.; CALCAGNO, M.L.; HEINRICH, J.; JASPER, H.; ROPELATO, M.G.

Buenos Aires, Argentina

Congreso; XVI Congreso de la Sociedad Argentina de Endocrinología y Metabolismo; 2009

Sociedad Argentina de Endocrinología y Metabolismo

EVALUACION DE LOS NIVELES SERICOS DE LA PROTEINA DE UNION DE ALTA AFINIDAD DE LA HORMONA DE CRECIMIENTO HUMANA (GHBP) Y DEL POLIMORFISMO DEL EXON 3 DEL GEN DEL RECEPTOR DE GH EN NIÑOS CON TALLA BAJA  IDIOPATICA. Ballerini M.G, Scaglia P, Domené H, Martinez A, Keselman A, Pipman V, Bengolea S, Cassinelli  H, Karabatas L, Calcagno M.L., Heinrich J, Jasper H, Ropelato M.G. División Endocrinología-Centro de Investigaciones Endocrinológicas (CEDIE/CONICET). Hospital de Niños R. Gutiérrez. Buenos Aires, Argentina Introducción: La hormona de crecimiento humana (GH) circula libre y unida (aproximadamente el 50%) a la GHBP, generada por el clivaje proteolítico del dominio extracelular (DEC) del GHR. La región codificante para DEC del gen GHR presenta un polimorfismo que genera dos isoformas con idéntica afinidad por la GH: una isoforma que retiene al exón 3: full-length (GHRfl), y una que lo pierde por deleción genómica (GHRd3). Se ha propuesto que el estudio de este genotipo permitiría predecir la respuesta al tratamiento con GH en sujetos deficitarios de GH. Sin embargo, no ha sido estudiada su utilidad diagnóstica en la talla baja idiopática (TBI), donde se han caracterizado algunas formas parciales de insensibilidad a la GH debidas a mutaciones heterocigotas en el gen GHR. En un trabajo previo, establecimos que los niños normales homocigotas GHRfl/fl presentan mayores niveles de GHBP comparados con los niños normales GHRd3 (homocigota o heterocigota). Hipótesis: Los niños con TBI presentarían una menor concentración de GHBP en suero que los sujetos normales reflejando en algunos casos alteraciones en el DEC del GHR independientemente de la presencia del polimorfismo del exón 3 del gen GHR. Objetivos: 1-Determinar la concentración de GHBP sérica en niños con TBI y compararla con la obtenida en niños normales. 2-Estudiar la posible asociación del polimorfismo del exón 3 del gen GHR con los niveles circulantes de GHBP en niños con TBI. 3- Identificar entre los niños con TBI aquellos candidatos al estudio molecular del gen GHR. Métodos: Se estudiaron 90 niños con TBI, con talla < –2.5 DS y velocidad de crecimiento por debajo del Pc 10, en los que se descartaron otras causas de talla baja, con respuesta normal o exagerada a pruebas de estímulo de GH (secuencial: arginina E.V. 0.5g/kg-clonidina oral 100 mg/m2, potenciadas en niños mayores de 8 años por la administración previa de estrógenos). Los niños con TBI se compararon con un grupo de 196 niños normales. Se determinó: GHBP (método fluoroinmunofuncional desarrollado), GH (IQMA), IGF-I (RIA, previa extracción de las proteínas transportadoras), IGFBP-3 (IRMA), ALS (RIA); los resultados de GHBP é IGF-I, IGFBP3 y ALS se expresaron en Score de Desviación Estándar (SDS). Se estudió el polimofismo del exón 3 del DEC del gen GHR mediante PCR Multiplex, empleando un primer sense (G1) y dos anti-sense (G2 en intrón 3 y G3 en exón 3). Se realizó electroforesis en gel de poliacrilamida. Los niveles de GHBP se  estudiaron según el genotipo del DEC del GHR: homocigotas GHRfl/fl (GHRfl, n=55) y homo o heterocigotas GHRd3/d3 y GHRfl/d3, respectivamente, (GHRd3, n=35). Se utilizó análisis de varianza (ANOVA) de dos vías, ajustando por  el SDS-IMC y SDS-Insulina, y análisis de correlación de Spearman. Resultados: La regresión con las covariables no fue estadísticamente significativa y se eliminaron del modelo. Los niños con TBI presentaron valores significativamente menores de GHBP sérica que los normales (p=0.016), mientras que no se observaron diferencias respecto del polimorfismo (p=0.285). En niños con TBI los niveles de GHBP correlacionaron negativamente con la máxima respuesta de GH al test de estímulo (r=-0.28; p=0.012). La concentración de GHBP no se asocio a variaciones en los SDS-Talla, SDS-IGF-I, SDS-IGFBP3 ni SDS-ALS. En un subgrupo de TBI y niveles de GHBP < -1.5 SDS (n=18), 88.9% presentó por lo menos un parámetro bioquímico GH dependiente (IGF-I, IGFBP3 o ALS) < -2.0 SDS, mientras que el 22.2% y el 16.7% de ellos tenía dos y tres parámetros < -2.0 SDS, respectivamente. Conclusiones: El polimorfismo del DEC del GHR no condicionaría las diferencias observadas entre los niveles de GHBP de los niños normales versus los niños con TBI. En consecuencia, el estudio de este polimorfismo no aportaría información adicional en la identificación de posibles alteraciones en el gen GHR en la TBI. En pacientes con TBI, una respuesta normal/exagerada al test de secreción de GH, con niveles de GHBP < -1.5 SDS acompañados de niveles disminuidos de los parámetros bioquímicos GH dependientes, sugiere insensibilidad parcial a la acción de GH y podría orientar a la secuenciación del gen GHR.