CEDIE   05498
CENTRO DE INVESTIGACIONES ENDOCRINOLOGICAS "DR. CESAR BERGADA"
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Adenosina actúa como comunicador intercelular por mecanismos que involucran su ingreso a la célula.
Autor/es:
GALARDO MARÍA NOEL LUJÁN; RIERA MARÍA FERNANDA; PELLIZZARI ELIANA HERMINIA; SOBARZO CRISTIAN; DENDUCHIS BERTA; LUSTIG LIVIA; CIGORRAGA SELVA BEATRIZ; MERONI SILVINA BEATRIZ
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; LIII Reunión de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2008
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Investigación Clínica
Resumen:
Las señales extracelulares controlan los procesos metabólicos de la célula y el crecimiento y diferenciación de los tejidos. Se interpreta clásicamente que la respuesta biológica a dichas señales es el resultado de la unión a sus receptores específicos, sin embargo, podrían existir mecanismos alternativos. Nos propusimos analizar posibles acciones de adenosina (A) no mediadas por unión a receptores purinérgicos. Como modelo experimental se utilizó el cultivo de células de Sertoli (CS) estimuladas con A (1mM) o con un análogo de A que no entra a la célula pero se une al receptor, ciclohexiladenosina, (CHA 0,1 mM). Los resultados se expresan como X±DS, n=3, *p<0,05 vs basal (B). Se observó que A pero no CHA aumenta la producción de lactato (B: 4,2±0,7; A: 9,5±1,3*; CHA: 4,1±0,5 mg/mg ADN), la incorporación de glucosa a la célula (B: 415±21; A: 620±32*; CHA: 422±18 dpm/mg ADN) y el ARNm de GLUT1, MCT4 y LDH A  (GLUT1: 2,8±0,7*; MCT4: 2,2±0,5*; LDH A: 2,9±0,8*, veces de estímulo vs B). A también activó AMPK (kinasa activada por AMP) ya que se evidenció un incremento en la fosforilación de su sustrato, acetil-CoA carboxilasa. Dado que en una línea celular AMPK ha sido relacionada con la formación de uniones estrechas (UE) y que en CS las UE son esenciales para la formación de los compartimientos basal y apical del túbulo seminífero, se decidió analizar por inmunofluorescencia el efecto de A y CHA sobre la localización de Zonula Occludens-1 (ZO-1), proteína asociada a UE.  La disminución del calcio extracelular por agregado de EGTA 1,8 mM a las monocapas produjo internalización de ZO-1. La incubación simultánea con A pero no con CHA mantuvo la localización de ZO-1 en la periferia celular, efecto que fue bloqueado por la presencia de los inhibidores de adenosina kinasa (iodotubercidina 10 nM) y de AMPK (Compound C 20 mM). Los resultados demuestran que A puede regular la funcionalidad y la polaridad celular luego de su ingreso a la célula y de la activación de AMPK.