Efecto del grado de sialilación y complejidad de los oligosacáridos de FSH sobre la producción de inhibinas en células de la granulosa en cultivo.

LORETI, NAZARETH; ANDREONE, LUZ; TRIGO, ROMINA; BUSSMANN, URSULA; AMBAO, VERÓNICA; CAMPO, STELLA

Mar del Plata, Argentina

Congreso; LII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2007

Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC)

      La producción de inhibinas A y B en células de la granulosa está diferencialmente regulada por FSH, activina A, estradiol y factores producidos por el oocito. El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto de las diferencias en el grado de sialización y complejidad de los oligosacáridos presentes en la FSH recombinante humana (FSHrh) sobre la producción de inhibinas en células de granulosa (CG) Mediante isoelectroenfoque preparativo se aislaron análogos de carga de FSHrh en un rango de pH 2.6-7.5. Se obtuvieron dos preparaciones combinando fracciones con pH 3-4 (acídica, AC) y 5-7 (básica, BA). Cromatografía en ConA fue utilizada para aislar isoformas con diferente grado de complejidad en sus oligosacáridos: complejos (NR y DR) y de tipo híbrido (FR). Cultivos de CG de ratas prepúberes tratadas con DES fueron estimulados con FSHrh entera o isoformas (0.5-16 ng/ml) por 72 hs. Se determinaron los niveles de inhibina A (inhA) y B (inhB) por ELISAs. La producción basal de inhA e inhB fue 933±138 y 134±44 pg/ml  respectivamente (x±EEM). FSHrh estimuló predominantemente la producción de inhA en forma dosis-dependiente. Se observó una mayor sensibilidad de respuesta de la inhB frente a análogos de carga AC respecto de BA: 8.8±1.5 vs 1.5±0.2; en cambio la producción de inhA se vió favorecida por BA: 7.1±1.1 vs 2.0±0.3 (los resultados se expresan como veces de estímulo respecto del basal x±EEM). Las isoformas con oligosacaridos complejos, NR y DR, resultaron un estímulo más potente para la producción de inhB respecto de inhA (9.3±2.6 vs 3.5±0.3) en cambio las FR en el rango 0.5-2 ng/ml resultaron inhibitorias para la producción de inhB (0.5±0.1) estimulando ambos dímeros a la mayor dosis estudiada. Estos resultados sugieren que diferencias en el grado de sialización y de complejidad de los oligosacáridos presentes en la FSH son factores adicionales que modulan en forma diferencial la producción de inhibinas diméricas en CG en cultivo.