Regulación hormonal de la actividad endocrina de foliculos antrales tempranos en cultivo

VELAZQUEZ, ETHEL; ANDREONE, LUZ; PARBORELL, FERNANDA; ABRAMOVICH, DALHIA; AMBAO, VERÓNICA; CROXATTO, HORACIO B; TESONE, MARTA; CAMPO, STELLA

Buenos Aires, Argentina,

Congreso; XX Reunión Bienal de la Asociación Latinoamericana de Investigadores en Reproducción Humana (ALIRH).; 2007

Asociación Latinoamericana de Investigadores en Reproducción Humana (ALIRH)

El cultivo de folículos ováricos es un buen modelo para estudiar la regulación hormonal de su actividad endocrina, pues mantiene intacta su arquitectura y relación entre los distintos tipos celulares. En el estadío antral temprano se define el destino del folículo: su selección para alcanzar el estado preovulatorio o la muerte por atresia. El desarrollo folicular y la actividad endocrina de folículos antrales (FA) dependen principalmente de la Hormona Folículo Estimulante (FSH), glicoproteína que presenta variantes de glicosilación las cuales difieren en la composición de sus carbohidratos y biopotencia. El objetivo del presente trabajo fue determinar la actividad esteroidogénica en presencia de diferentes sustratos, la expresión génica y producción de inhibinas (inh) y activina A (actA) y la respuesta a FSH y sus variantes glicosiladas en FA tempranos en cultivo. FA (~350µm) de ratas  de 21-23 días tratadas con dietilestilbestrol, fueron aislados por microdisección y cultivados durante 24 horas en condiciones basales y en presencia de androstenediona (A), progesterona (P), 25OH-colesterol (25OH-col), FSH recombinante (FSHrh, 25-50 ng/ml) y sus variantes glicosiladas aisladas en Concanavalina-A, con oligosacáridos complejos (DR) e híbridos (FR) (25ng/ml). Se determinó la producción de estradiol (E2) por RIA; expresión de los ARNm para subunidades de inhibina por RT-PCR semicuantitativa y niveles de actA, Pro-αC, inhA e inh B por ELISA.  En condiciones basales, la producción fue: E2=75±18 pg/ml y aumentó con A, P, FSHrh y DR (P<0.05);  actA=1.1 ± 0.1 ng/ml y aumentó con FSH y sus isoformas (P<0.01); Pro-αC=2320±261 pg/ml y aumentó con DR (P<0.01); inhA=695±30 pg/ml y aumentó con FSHrh, DR y FR (P<0.05); inhB=3486±726pg/ml y no se modificó con FSHrh o sus isoformas. 25OH-col fue el estímulo más potente para la producción de todas las inhibinas (Pro-αC, inhA e inhB= 2.3, 2 y 1.9 veces respecto del basal, respectivamente; P<0.05). La expresión de los RNAm para las tres subunidades de inhibina aumentaron entre 1.2 y 2.2 veces con FSH y 25OH-col, respecto del basal. Los resultados muestran que FA tempranos en cultivo tienen la capacidad de producir esteroides y péptidos, respondiendo en forma diferencial a FSH y a sus variantes glicosiladas. En ausencia de FSH, el 25OH-col o un derivado esteroideo no identificado, favorece la producción de inhibinas por un mecanismo que no ha sido aún aclarado.