CEDIE   05498
CENTRO DE INVESTIGACIONES ENDOCRINOLOGICAS "DR. CESAR BERGADA"
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Transporte mitocondrial de insulina
Autor/es:
PASSICOT GA; CAMBEROS MC; CRESTO JC
Lugar:
21-24 de Noviembre, Mar del Plata, Argentina
Reunión:
Congreso; LII Reunión Científica Anual de la SAIC; 2007
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC)
Resumen:
Objetivos: La insulina regula la síntesis y actividad de varias enzimas mitocondriales  importantes y controla el transporte de substratos oxidables sugiriendo que la mitocondria es una organela insulino-dependiente. Nosotros demostramos que la enzima degradante de insulina (EDI) se encuentra en la matriz mitocondrial (MM). Nuestro objetivo fue determinar si EDI facilita la incorporación mitocondrial de insulina. Métodos: EDI se obtuvo de músculo de rata por sucesivos pasos cromatográficos. Mitocondrias hepáticas fueron aisladas según Parson y cols., recuperadas e incubadas a distintos tiempos a 25ºC con  oxígeno 100% e insulina. De acuerdo al diseño experimental se agregaron EDI, substratos o inhibidores. La reacción fue detenida con 1 mM de N-etilmaleimida. La MM fue aislada por digestión con digitonina y el transporte y la degradación de insulina se determinaron por cromatografía en Sephadex G50, electroforesis en SDS-PAGE, inmunoblot y autorradiografía. Resultados: La contaminación peroxisomal y citoplasmática en MM fue residual. EDI incrementa la incorporación a MM de insulina en forma dosis/dependiente. El dinitrofenol, vanadato y succinato+ADP lo disminuyen. En las condiciones del estudio, EDI no degrada la insulina, por lo tanto la degradación es debida a las proteasas mitocondriales (pg/seg/mg prot; control: 0.87; EDI: 0.88). Las cromatografías y autorradiografías de MM demostraron que la insulina se incorpora a MM a través del sistema de transporte mitocondrial, siendo EDI el que facilita el transporte. El estudio sugiere que la insulina es incorporada activamente a la MM. Conclusiones: EDI facilita la incorporación mitocondrial de insulina.