Three ALS deficient patients in a non consanguineous family presenting four different IGFALS gene variants.

SCAGLIA, PAULA; KESELMAN, ANA; MARTUCCI, LUCIA; KARABATAS, LILIANA; BALLERINI, MARIA GABRIELA; DOMENE, SABINA; RODRIGUEZ AZRAK, SOL; JASPER, HECTOR; DOMENE, HORACIO

Playa del Carmen

Congreso; XXIV Reunión anual de la SLEP; 2014

Sociedad Latinoamericana de Endocrinoologia Pediatrica

Introducción: La deficiencia completa de ALS (ALS-D), causada por mutaciones inactivantes en ambos alelos del gen IGFALS, se presenta con deficiencia severa de IGF-I e IGFBP-3 asociada a un retardo moderado del crecimiento. Objetivo: Caracterizar el defecto molecular en una familia en la que el caso índice y su padre presentaron talla baja con deficiencia de IGF-I e IGFBP-3. Sujetos y métodos: Se estudió un niño de 2.4 años (A, caso índice), su padre (B), madre (C), hermano (D), tía (E) y abuela paternas (F). Los niveles séricos de IGF-I, IGFBP-3 y GH se determinaron por quimioluminiscencia (Immulite, Siemmens), ALS por ELISA (Mediagnost) y Western immunoblot (WIB). La formación de complejos ternarios in vitro [CT = (cpm pico/cpm total) x 100] se evaluó por cromatografía de exclusión molecular en columnas (Superdex, GE Healthcare) luego de incubar el suero de los pacientes con 125I-IGF-I. El gen IGFALS fue amplificado por PCR y secuenciado. Se utilizaron herramientas bioinformáticas para predecir el efecto de las variantes génicas sobre la función de la proteína. Tres de las 4 variantes génicas halladas se expresaron in vitro en células CHO y la expresión de ALS se evaluó por WIB. Resultados: El caso índice, que presentó talla baja con secreción normal de GH (GHmax: 15.3 ng/ml) y niveles de IGF-I, IGFBP-3 y ALS no detectables, resultó heterocigoto compuesto para una mutación con cambio del marco de lectura (c.103dupG, p.E35Gfs*17) y un cambio puntual no descripto previamente (c.1469C>G, p.S490W). Su padre resultó heterocigoto compuesto para la nueva variante p.S490W y dos variantes previamente reportadas en una familia consanguínea con deficiencia de ALS (p.[L409F;A475V]). La madre y el hermano del paciente resultaron heterocigotos para cada una de las variantes presentes en el caso índice (p.E35Gfs*17 y p.S490W, respectivamente). Ambos presentaron niveles normales/bajos de IGFBP-3 y ALS. La tía paterna presentó el mismo genotipo que el padre mientras que la abuela paterna resultó portadora de las variantes p.[L409F;A475V]. El análisis in silico determinó que las variantes p.S490W, p.L409F y p.E35Gfs*17 serían potencialmente patogénicas mientras que la p.A475V sería benigna. Los estudios de expresión in vitro en células CHO demuestran que las mutantes p.L409F y p.E35Gfs*17 no se expresan mientras que p.A475V se expresa y secreta normalmente. Conclusiones: El hallazgo de individuos adultos con ALS-D no diagnosticados en la infancia, heterocigotos compuestos para mutaciones en el gen IGFALS (con talla baja o normal) y la aparición de portadores heterocigotos en una familia no consanguínea, apoya la hipótesis de que estas variantes genéticas están presentes en la población y no se encuentran bajo una fuerte presión selectiva negativa. Asimismo, el estudio de expresión in vitro de las variantes demuestra que p.E35Gfs*17 y p.L409F son variantes con pérdida de función. Este es el primer reporte demostrando que la fertilidad está preservada en un paciente adulto con deficiencia de ALS.