PARTICIPACIÓN DEL FACTOR INDUCIBLE POR HIPOXIA (HIF-1) EN LA REGULACIÓN DE LA FUNCIÓN NUTRICIONAL DE LA CÉLULA DE SERTOLI (CS)

GALARDO M NOEL; REGUEIRA MARIANA; RIERA M FERNANDA; PELLIZZARI ELIANA H; CIGORRAGA SELVA B; MERONI SILVINA B

Valdivia

Congreso; XXIV Reunión Anual de la Sociedad Chilena de Reproducción y Desarrollo.; 2013

Sociedad Chilena de Reproducción y Desarrollo

Uno de los papeles preponderantes de la CS es la producción de lactato, fuente energética de las células germinales. HIF-1 es un factor de trascripción relacionado con el metabolismo glucolítico y la producción de lactato. Varios genes que codifican para proteínas que participan el metabolismo de la glucosa contienen elementos respondedores a hipoxia (HRE) en sus promotores, sitios que son reconocidos por HIF-1. En este trabajo evaluamos la participación de HIF-1 en la regulación de los mecanismos moleculares involucrados en la producción de lactato por CS. Cultivos de CS de rata de 20 días de edad fueron estimulados con cloruro de cobalto (CoCl2 300μM) por distintos períodos de tiempo. Se analizó: los niveles de la proteína HIF-1a, la entrada de glucosa a la célula, la actividad LDH, la producción de lactato y los niveles de ARNm de GLUT1, PKM2, LDHA y PDK1. Confirmamos por Western blot que el CoCl2 incrementa los niveles de HIF-1a (CoCl2 4hs:5,4±0.5 veces de estímulo con respecto al basal). Hemos observado que el estímulo con CoCl2 48hs produce un aumento de: la entrada de glucosa (B:524±92; CoCl2:1874±55*dpm/μgADN), la actividad de LDH (B:22,6±0,6; CoCl2:30,2±0,2*mUI/μgADN) y la producción de lactato (B:6,7±0,3; CoCl2:22,8±2,9*μg/μgADN) (X±DS, n=3, p menor 0.05). Asimismo, la expresión de los genes con HRE en su promotor fue incrementada por CoCl2 (GLUT1:4,0±0,2; PKM2:2,5±0,2; LDHA:3,0±0,5; PDK1:2,7±0,3 veces de estímulo con respecto al basal). Estos resultados sugieren que HIF-1 podría ser uno de los factores de transcripción responsables de regular la producción de lactato en la CS.