Alteraciones en la expresión de las moléculas involucradas en las uniones intercelulares de células de Sertoli, inducidas por la acción in vitro del Mono-(2-etilhexil) Ftalato (MEHP): papel del Glutatión.

SOBARZO C; NOGUEIRA DE MORAES R; LUSTIG L; DENDUCHIS B; SCHTEINGART H

Mar del Plata

Congreso; LVI Reunión Científica Anual SAIC; 2011

SAIC, SAFIS, AACYTAL

Se ha descrito que el metabolito activo del di-(2-etilhexil) fta­lato, el MEHP, es un tóxico que induce estrés oxidativo y atrofia testicular. El objetivo de este trabajo es estudiar, en cultivos de células de Sertoli (CS), el efecto del MEHP sobre la integridad de las uniones intercelulares y la participación del glutatión (GSH) en el daño por estrés oxidativo. Se aislaron CS de ratas de 20 días de edad y se cultivaron por 5 días en medio químicamente definido. Los cultivos celulares se estimularon con MEHP (200 µM) (E) y sin MEHP (C) durante las últimas 24 horas. Los niveles de GSH intracelular total se determinaron por un método espectrofo­tométrico. Los datos se expresan como % del basal, media ± DS, n=6, (Basal: 344.7±21.8 pmolGSH/μgDNA). El MEHP disminuyó significativamente los niveles de GSH intracelular a un valor de 24± 5* vs el basal (*p<0,01). Por inmunofluorescencia (IF) y ?Western blot? (Wb) se determinó la localización y expresión de las proteínas de las uniones adherentes: N-cadherina (N-cad) y a y b-cateninas; estrechas: ocludina, claudina-11 y ?zonula occludens? (ZO-1) y de las nexo: Conexina-43 (Cx-43). Se observó un patrón lineal de IF localizado a nivel de las uniones inter-Sertoli, en las proteínas ana­lizadas tanto en los C como en los E. Sin embargo, observamos para N-cad, α-catenina y ZO-1 una deslocalización de la señal desde las zonas de contacto entre las células hacia el citoplasma en los E comparados a los C. Por Wb se observó un aumento en la expresión de N-cad, α-catenina y ZO-1, y una disminución significativa de Cx-43 en los E respecto de los C. No se detectaron variaciones en la expresión de claudina-11 y ocludina. En base a nuestros resultados y a los obtenidos en otros modelos se sugiere que MEHP induce estrés oxidativo, evidenciado por los niveles disminuidos de GSH, generando alteraciones de las moléculas que constituyen las uniones adherentes y nexo, y no modificando la expresión de las moléculas de las uniones estrechas.