ICT - MILSTEIN   05483
INSTITUTO DE CIENCIA Y TECNOLOGIA "DR. CESAR MILSTEIN"
Unidad Ejecutora - UE
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- Pautas para elaborar Manuales de Aseguramiento de la Calidad y Procedimientos Operativos Estándar. (ST 1365)[+]Detalle STANPermite a las EBT elaborar sus manuales de Aseguramiento de Calidad (QA) y Procedimientos Operativos Estándar (SOP) para servicios o productos que ofrece. Se establecen procedimientos de trabajo en condiciones estandarizadas a fin de ser reproducibles y trazables. Los documentos generados son de uso frecuente en empresas de desarrollo tecnológico y resultan indispensables para poner en valor a las mismas y disponer de elementos legales al momento de proteger eventuales desarrollos patentables.MetodologíaPresentaciones oralesDisciplina PrimariaDesarrollo tecnológico y social proyectos complejosDisciplina DesagregadaBIOTECNOLOGIACampo de AplicaciónSalud humanaActividad IndustrialActividades profesionales, científicas y técnicas n.c.p.Palabras ClaveAseguramiento de la Calidad
Procedimiento Operativo Estándar
- Evaluación de drogas/activos en un modelo celular de interacciones epitelio- mesénquima de folículo piloso para determinar actividad
sobre la diferenciación de las células madre del folículo piloso.
: Estudio del efecto de los activos sobre la diferenciación de las HFSC mediada por DPC sensibles a la acción
androgénica y determinación de la activación de la vía de señalización Wnt/β-catenina en DPC por el activo.
(ST 1857)[+]Detalle STANLas células madre del folículo piloso migran a la matriz del pelo e inician su división y diferenciación bajo la influencia de factores paracrinos producidos por las células de la papila dérmica. Durante el desarrollo de la alopecia androgenética, los andrógenos provocan la miniaturización de los folículos sensibles del cuero cabelludo actuando a través de las DPC. Por el contrario, la vía Wnt/ β-catenina afecta positivamente el crecimiento del pelo.Prestación DetalleEstudio del efecto de los activo/s sobre la diferenciación de las HFSC mediada por DPC sensibles a la acción androgénica. Evaluación de la expresión de marcadores de diferenciación a línea folicular de las HFSC por Western blot. Determinación de la activación de la vía de señalización Wnt/β-catenina en DPC por el activo que pudiera afectar su actividad diferenciadora sobre las HFSCMetodologíaModelo de estudio: Cocultivos celulares de DPC y HFSC 1)Estudio del efecto de los activos sobre la diferenciación de las HFSC mediada por DPC sensibles a la acción androgénica. A. Evaluación de la expresión de marcadores de diferenciación a línea folicular de las HFSC por Western blot 2) Determinación de la activación de la vía de señalización Wnt/β-catenina en DPC por el activo que pudiera afectar su actividad diferenciadora sobre las HFSC. A. Expresión de β-catenina en extractos proteicos totales y citoplasmáticos de DPCDisciplina PrimariaCiencias MédicasDisciplina DesagregadaMEDICINA-DERMATOLOGIACampo de AplicaciónSalud humanaActividad IndustrialInvestigación y desarrollo experimental en el campo de las ciencias médicasPalabras ClaveAlopecia androgenética
Folículo piloso
Papila dérmica
Diferenciación de células madre de folíc
- Evaluación de drogas/activos en un modelo celular de interacciones epitelio- mesénquima de folículo piloso para determinar actividad
sobre la diferenciación de las células madre del folículo piloso.
: Evaluación de activos que puedan influir sobre la diferenciación de células madre de folículo piloso mediante co-cultivos celulares como modelo celular de interacciones epitelio- mesénquima en folículo piloso.(ST 1856)[+]Detalle STANLas células madre del folículo piloso migran a la matriz del pelo e inician su división y diferenciación bajo la influencia de factores paracrinos producidos por las células de la papila dérmica. Durante el desarrollo de la alopecia androgenética, los andrógenos provocan la miniaturización de los folículos sensibles del cuero cabelludo actuando a través de las DPC. Por el contrario, la vía Wnt/ β-catenina afecta positivamente el crecimiento del pelo.Prestación DetalleEstudio del efecto de los activo/s sobre la diferenciación de las HFSC mediada por DPC sensibles a la acción androgénica. Evaluación de la expresión de marcadores de diferenciación a línea folicular de las HFSC por Q RT PCRMetodologíaModelo de estudio: Cocultivos celulares de DPC y HFSC Evaluación de la expresión de marcadores de diferenciación a línea folicular de las HFSC por Q RT PCREquipamientoPCR EN TIEMPO REAL Applied Biosystem ABI 7500Disciplina PrimariaCiencias MédicasDisciplina DesagregadaMEDICINA-DERMATOLOGIACampo de AplicaciónSalud humanaActividad IndustrialInvestigación y desarrollo experimental en el campo de las ciencias médicasPalabras ClaveAlopecia androgenética
Folículo piloso
Papila dérmica
Diferenciación de células madre de folíc
- Asesoramiento para el registro de fármacos en Agencias Regulatorias Nacionales e Internacionales. Desarrollo de estudios pre-clínicos de toxicidad, protocolos y documentación.(ST 2413)[+]Detalle STANSe brinda asesoramiento técnico-profesional para planificar estudios, elaborar protocolos de trabajo ("Procedimientos Operativos Estándar o "Standard Operating Procedure"-SOP) y/o confeccionar la documentación necesaria para presentar los estudios pre-clínicos de toxicidad a fin de solicitar el registro de fármacos en Agencias Regulatorias Nacionales e Internacionales.MetodologíaPresentaciones orales y material escrito. Elaboración de documentos.Disciplina PrimariaDesarrollo tecnológico y social proyectos complejosDisciplina DesagregadaBIOTECNOLOGIACampo de AplicaciónSalud humanaActividad IndustrialInvestigación y desarrollo experimental en el campo de las ciencias médicasPalabras ClaveRegistro de fármacos
Procedimiento Operativo Estándar
Estudios pre-clínicos
Toxicidad
Standard Operating Procedure
- Cuantificación de anticuerpos contra Echinococcus granulosus por técnicas serológicas.(ST 3859)[+]Detalle STANConjunto de técnicas de laboratorio serológicas precisas e inequívocas aplicadas a la cuantificación de niveles de anticuerpos contra Echinococcus granulosus en ovinos, caprinos, bovinos y camélidos.MetodologíaSe trata de técnicas analíticas validadas para la cuantificación precisa de anticuerpos contra Echinococcus granulosus o contra el antigeno vacunal EG95 en el suero de diferentes especies animales (ovinos, caprinos, bovinos y camélidos). La prestación se realiza utilizando técnicas de ELISA, (con antígenos extractivos o recombinantes y anticuerpos monoclonales). Los procedimientos operativos y las técnicas fueron desarrollados cumpliendo Normas ISO 9001 y Buenas Prácticas de Laboratorio.EquipamientoMicrocentrífuga Labnet Internacional 24D DigitalDisciplina PrimariaBiologíaDisciplina DesagregadaBIOLOGIA-VIROLOGIACampo de AplicaciónSanidad animal-Protec. y asistencia veterinActividad IndustrialServicios veterinariosPalabras ClaveHidatidosis
ELISA
Echinococcus granulosus
EG95
Ag8 KDa
- Cuantificación de anticuerpos contra patógenos aviares por técnicas serológicas.
(ST 4037)[+]Detalle STANCuantificación de anticuerpos contra patógenos que afectan la producción aviar por técnicas serológicas.MetodologíaSe trata de técnicas analíticas validadas para la cuantificación precisa de anticuerpos contra Enfermedad de Newcastle, Bronquitis infecciosa, Gumboro o bursitis, Laringotraqueitis aviar, Leucosis linfoide, Viruela Aviar, Influenza aviar, Peste aviar (Influenza aviar altamente patógena), Enfermedad de Marek, Encefalomielitis aviar, en el suero de diferentes especies aviares. La prestación se realiza utilizando técnicas de ELISA, (con antígenos extractivos o recombinantes y anticuerpos monoclonales). Los procedimientos operativos y las técnicas fueron desarrollados cumpliendo Normas ISO 9001 y Buenas Prácticas de Laboratorio.EquipamientoMicrocentrifuga Labnet Internacional C2500 | Micropipeta Thermo Fisher F2Disciplina PrimariaBiologíaDisciplina DesagregadaBIOLOGIA-VIROLOGIACampo de AplicaciónSanidad animal-Protec. y asistencia veterinActividad IndustrialServicios veterinariosPalabras ClaveDiagnostico de virosis en aves
Newcastle, Bronquitis Inf- Gumboro
Leucosis aviar Viruela aviar Peste aviar
Laringotraqueitis aviar- Enf de Marek
Encefalomielitis aviar-Influenza aviar
- Estudios de inmunidad poblacional. Análisis del nivel de anticuerpos especificos contra Echinococcus granulosus por técnicas serológicas.(ST 4038)[+]Detalle STANConjunto de técnicas de laboratorio serológicas precisas e inequívocas aplicadas a la determinación de niveles de anticuerpos contra Echinococcus granulosus en ovinos, caprinos, bovinos y camélidos.MetodologíaSe trata de técnicas analíticas validadas para la caracterización de sueros respecto de su nivel de anticuerpos contra Echinococcus granulosus (diagnostico) o contra el antígeno EG95 (anticuerpos vacunales) en el suero de diferentes especies animales (ovinos, caprinos, bovinos y camélidos). La prestación se realiza utilizando técnicas de ELISA, (con antígenos extractivos o recombinantes y anticuerpos monoclonales). Se establece un valor de corte para calificar los sueros como reactivos o no reactivos (estudio de tipo cualitativo). Útil para estudios de tipo poblacional. Los procedimientos operativos y las técnicas fueron desarrollados cumpliendo Normas ISO 9001 y Buenas Prácticas de Laboratorio.EquipamientoMicrocentrífuga Labnet Internacional 24D Digital | Estufa de Cultivo San Jor SL70CDisciplina PrimariaBiologíaDisciplina DesagregadaBIOLOGIA-VIROLOGIACampo de AplicaciónSanidad animal-Protec. y asistencia veterinActividad IndustrialServicios veterinariosPalabras ClaveHidatidosis
ELISA
Antígenos virales
Inmunidad poblacional contra hidatidosis
- Servicio de caracterización del reconocimiento biomolecular proteína -proteína, proteína - péptido, proteína - glúcidos, proteína - lípido, proteína - nucleotido, por medio de la espectrometría de SPR o biosensor óptico: Prestación (mediciones de la cinética de la interacción): 8 hs/ensayo; 1-4 interacciones de un mismo ligando. Por ej: cinética de 4 fragmentos Fab por antígeno. Prestación de estudios preliminares (prueba de factibilidad): 4 hs e insumos directos.(ST 4139)[+]Detalle STANConsiste en la evaluación de un proyecto para analizar la factibilidad y para diseñar un protocolo para evaluar interacciones entre las biomoléculas (etapa 1: evaluación del proyecto, consulta). Una vez establecidos los protocolos de análisis (etapa 2: estudios preliminares o prestación corta), las interacciones biomoleculares se visualizan en tiempo real y se observa cómo se forman y cómo se disocian los complejos (etapa 3: cierre del protocolo e informe).Prestación DetalleEntrega de los protocolos, consumo de reactivos y resultados preliminares para realizar los ensayos en un biosensor automático. El cálculo de los parámetros cinéticos de interacción a partir de estas señales depende completamente de la precisión con que se hayan estimado las concentraciones de las biomoléculas y de los tiempos de formación y disociación de los complejos (etapa 4 optativa: análisis cinético y afinidad).MetodologíaLa caracterización de las interacciones moleculares por la tecnología del censado de resonancia de plasmones de superficie permite obtener señales del cambio de masa molecular sobre el sensor en tiempo real y sin necesidad de reporteros (tag) adicionales. Uno de los reactivos es inmovilizado químicamente o por captura específica en la superficie del sensor, se denomina ligando (generalmente el consumo de ligando es de 2-5 ?g por ensayo). El segundo reactivo, llamado analito, se inyecta a distintas concentraciones y su consumo depende de la afinidad de la interacción y de su peso molecular. La concentración del analito debe estar determinada con precisión para obtener parámetros cinéticos representativos y describir la interacción ligando-analito, es decir, el mecanismo de formación del complejo. La interacción debe ser específica por lo que es necesario contar con controles negativos y positivosDisciplina PrimariaDesarrollo tecnológico y social proyectos complejosDisciplina DesagregadaBIOLOGIA-BIOFISICACampo de AplicaciónVarios camposActividad IndustrialInvestigación y desarrollo experimental en el campo de las ciencias médicas | Investigación y desarrollo experimental en el campo de las ciencias exactas y naturales n.c.p. | Investigación y desarrollo experimental en el campo de las ciencias agropecuariasPalabras ClaveReconocimiento biomolecular
Cinética de unión
Termodinámica de formación complejos
Especificidad de interacción
Inhibición y competición
- Servicios analíticos de proteínas y anticuerpos. Resolución de proteínas mediante electroforesis en geles de poliacrilamida. Análisis por SDS-PAGE y Western Blot.(ST 4141)[+]Detalle STANEl servicio está dirigido al análisis de proteínas biológicas de importancia clínica, comercial o industrial por medio de técnicas electroforéticas. También incluye el análisis del desempeño de anticuerpos monoclonales o policlonales por la técnica de Western Blot. El servicio incluye la resolución de proteínas en geles de poliacrilamida, el ensayo o análisis, y la interpretación de resultados y presentación de informe.MetodologíaSe evalúa el contenido de proteínas de muestras clínicas o comerciales o industriales por la técnica de SDS-PAGE. Mediante esta técnica se logra la separación de los componentes por diferencias en el peso molecular aplicando un campo eléctrico. Para la identificación de componentes con sueros o anticuerpos específicos se realiza la transferencia de los componentes a una membrana de nitrocelulosa y se realiza la técnica de Western Blot. El objeto de estudio en esta última técnica también puede ser el anticuerpo o suero para evaluar su desempeño como detector de ciertos componentes biológicos.Disciplina PrimariaBiologíaDisciplina DesagregadaBIOLOGIA-VIROLOGIACampo de AplicaciónTecnologia sanitaria y curativa-VariosActividad IndustrialFabricación de medicamentos de uso veterinario | Fabricación de medicamentos de uso humano y productos farmacéuticosPalabras ClaveAnálisis/identific de proteínas SDS-PAGE
Análisis/identif proteínas WESTERN BLOT
Análisis de sueros por Western Blot
Electroforesis en geles de poliacrilamid
- Asesoramiento para el registro de productos biológicos en Agencias Regulatorias Nacionales e Internacionales.
(ST 4229)[+]Detalle STAN"Asesoría, soporte, elaboración y revisión de la documentación técnica para trámites de Registro Sanitario en Agencias Regulatorias Nacionales e Internacionales."Metodología"Dar soporte en el registro de nuevos productos: armado de dossiers, parte documental, pruebas de campo y actualización de rotulado. Colaboración con la creación de procedimientos de calidad y de farmacovigilancia. Coordinación y ejecución de presentaciones regulatorias en conformidad con los estándares corporativos y los requisitos regulatorios locales. Gestión y ejecución de la preparación, entrega y archivo electrónico de la documentación para su inclusión en presentaciones regulatorias."Disciplina PrimariaIngeniería de ProcesosDisciplina DesagregadaBIOLOGIA-BIOINGENIERIA, BIOTECNOLOGIACampo de AplicaciónTecnologia sanitaria y curativa-VariosActividad IndustrialActividades profesionales, científicas y técnicas n.c.p. | Servicios veterinarios | Servicios de gerenciamiento de empresas e instituciones de salud; servicios de auditoria y medicina legal; servicio de asesoramiento farmacéuticoPalabras ClaveAsuntos regulatorios
Registro de biológicos
Registro de kits diagnósticos
Inscripción de productos en ANMAT,SENASA
- Servicio de ensamblado de reactivos y escalado de kits de diagnóstico para monitoreo de enfermedades de importancia en salud humana, animal y vegetal a través de la utilización de la estación automatizada Biomek FXp.(ST 4231)[+]Detalle STANEl servicio comprende el ensamblado de reactivos dentro de la producción de kits de diagnósticos serológicos o moleculares de enfermedades de importancia en salud humana, animal y vegetal. Producción a escala piloto, intermedia e industrial, mediante estación automatizada de pipeteo, Biomek FXp. El servicio incluye la purificación de ADN y ARN, diagnostico por PCR, RT-PCR, LAMP.MetodologíaEl ensamblado de reactivos, validación y escalado de la producción de kits de diagnóstico basado en técnicas inmunológicas implica la necesidad de determinar adecuadamente la molécula target a detectar, ya sea antígeno o anticuerpo. En cuanto a las técnicas moleculares, se determinará el ensamblado óptimo de los reactivos y su verificación posterior. Se realizan estudios de sensibilidad y especificidad de la técnica y la estabilidad de los reactivos componentes. La validación del procedimiento automatizado incluye la determinación del rendimiento analítico y diagnóstico de una prueba y de todos aquellos puntos críticos de control que requieran atención para un rendimiento óptimo: mantenimiento de las características de desempeño diagnóstico, repetitividad, reproducibilidad, aplicación al sistema automatizado y equivalencia de resultados. Todas las determinaciones se realizan bajo el Sistema de Gestión del laboratorio cuya plataforma de producción y equipamiento cuenta con la Certificación y Recertificación ISO 9001: 2008 y habilitación de la Administración Nacional de Medicamentos, Alimentos y Tecnología Médica (ANMAT) y Servicio Nacional de Sanidad y Calidad Agroalimentaria (SENASA).EquipamientoLector de microplacas BMG Labtech SPECTROstarDisciplina PrimariaIngeniería de ProcesosDisciplina DesagregadaBIOLOGIA-BIOINGENIERIA, BIOTECNOLOGIACampo de AplicaciónTecnologia sanitaria y curativa-VariosActividad IndustrialInvestigación y desarrollo experimental en el campo de la ingeniería y la tecnologíaPalabras ClaveDesarrollo kit diagnóstico molecular
Desarrollo kit diagnóstico inmunologico
Producción kit diagnóstico inmunológico
Producción kit diagnóstico molecular
- Caracterización de bibliotecas de anticuerpos de dominio único derivados de camélidos (VHHs o Nanoanticuerpos).(ST 4320)[+]Detalle STANSe analizarán bibliotecas ya generadas por externos. Se determinarán e informarán parámetros como el tamaño de la biblioteca (diluciones seriadas de bacterias en placas con agar y antibiótico), la variabilidad de la biblioteca (corte con enzimas de restricción específicas) y el porcentaje de insertos de tamaño correcto (por PCR usando primers que reconocen las regiones conservadas).MetodologíaEl tamaño de la biblioteca se determinará mediante diluciones seriadas de las bacterias electrotransformadas que serán cultivadas en placas de Petri con agar y antibiótico. El porcentaje de insertos de tamaño correcto, que es una medida de la calidad de la biblioteca, se determinará por PCR usando primers que reconocen las regiones conservadas. La variabilidad de la biblioteca se determinará por PCR seguida por restricción con la enzima de corte frecuente HinfI.EquipamientoTransiluminador Vilmer Lourmat TFX-35m | Centrifuga Sorbal ST16RDisciplina PrimariaBiologíaDisciplina DesagregadaBIOLOGIA-BIOINGENIERIA, BIOTECNOLOGIACampo de AplicaciónTecnologia sanitaria y curativa-VariosActividad IndustrialInvestigación y desarrollo experimental en el campo de las ciencias médicas | Investigación y desarrollo experimental en el campo de las ciencias exactas y naturales n.c.p.Palabras ClaveAnticuerpos recomb. (Fab, scFv y VHH)
Expresión proteica en bacteria
Nanoanticuerpos
ELISA
SDS-PAGE/Western blot
- Generación de anticuerpos de dominio único derivados de camélidos (VHH o Nanoanticuerpos) a partir de antígenos proteicos o células(ST 4318)[+]Detalle STANSe obtendrán VHHs a partir de llamas inmunizadas con antígenos de interés, se generará una biblioteca de genes, luego biopanning y expresión de los VHHs candidatos. El producto a entregar puede ser un plásmido codificando el VHH o la proteína purificada. Se utilizarán técnicas de inmunología y biología molecular como extracción de ARN. Western Blot y SDS-PAGE, ELISA, clonado, PCR, biopanning, expresión y purificación de proteínas, para generar VHHs específicos de los antígenos a inmunizar.MetodologíaCalidad del antígeno: SDS-PAGE/Western Blot. Inmunización: 1 mg de proteína o 1x107 células. Título de inmunoglobulinas: ELISA. Obtención de monocitos, extracción de ARN, retrotranscripción, PCR y clonado en un vector fagémido. Biblioteca: determinación del tamaño y el porcentaje de insertos. Biopanning en fase sólida. Determinación del reconocimiento específico: ELISA de fagos y de periplasma bacteriano. Secuenciación, subclonado en vector de expresión y purificación por cromatografía de afinidad.EquipamientoTransiluminador Vilmer Lourmat TFX-35m | Centrifuga Sorbal ST16RDisciplina PrimariaBiologíaDisciplina DesagregadaBIOLOGIA-BIOINGENIERIA, BIOTECNOLOGIACampo de AplicaciónTecnologia sanitaria y curativa-VariosActividad IndustrialInvestigación y desarrollo experimental en el campo de las ciencias exactas y naturales n.c.p. | Investigación y desarrollo experimental en el campo de las ciencias médicasPalabras ClaveNanoanticuerpos o VHH
Bibliotecas de Anticuerpos
Anticuerpos monoclonales
Anticuerpos recombinantes
Antic. de dom. único deriv. de camélidos
- Modificación de anticuerpos de dominio único derivados de camélidos (VHH o Nanoanticuerpos).(ST 4319)[+]Detalle STANLas modificaciones a realizar consisten en la fusión de los VHHs provistos a proteínas fluorescentes como GFP o mCherry, o el agregado de la región Fc de anticuerpos convencionales, o la generación de moléculas bivalentes mono o biespecíficas, uniendo el mismo o diferentes VHHs a través de linkers de diferentes tamaños. Para generar las diferentes construcciones se utilizarán vectores diseñados en nuestro laboratorio aplicando técnicas como clonado clásico o infusion.MetodologíaPara modificar los VHHs seleccionados se utilizan plásmidos generados en el laboratorio que permiten subclonar el gen de interés en el plásmido deseado. Se pueden convertir VHHs monovalentes en bivalentes adicionando un linker de 5 ó 10 Glicinas-Serinas. Se puede agregar una secuencia de secreción y regiones CH2 y CH3 de anticuerpos convencionales. Se cuenta también con plásmidos que permiten agregar las proteínas GFP o mCherry.EquipamientoTransiluminador Vilmer Lourmat TFX-35m | Centrifuga Sorbal ST16RDisciplina PrimariaBiologíaDisciplina DesagregadaBIOLOGIA-BIOINGENIERIA, BIOTECNOLOGIACampo de AplicaciónTecnologia sanitaria y curativa-VariosActividad IndustrialInvestigación y desarrollo experimental en el campo de las ciencias médicas | Investigación y desarrollo experimental en el campo de las ciencias exactas y naturales n.c.p.Palabras ClavePhage display
Anticuerpos recombinantes
Bibliotecas de Anticuerpos
Biopanning
VHH/Nanoanticuerpos
- Generación y/o caracterización de anticuerpos policlonales: Caracterización de la muestra(ST 4482)[+]Detalle STANEl servicio consiste en generar muestras de suero específicos contra la proteína de interés generados en ratón. Por otros animales de laboratorio consultar (rata, conejo, etc).Prestación DetalleComo servicio adicional se ofrece complementar las necesidades analíticas del uso de la muestra por parte del cliente, mediante su caracterización.MetodologíaLa generación de los antisueros se producen bajo lineamientos de procedimientos operativos estándares (POE´s). Garantizamos la generación de sueros hiperinmunes mediante la utilización y/o combinación de diferentes adyuvantes. Los animales que se utilizan cuentan con certificados de sanidad que requiere la Disposición ANMAT N°6344/96.Disciplina PrimariaVeterinariaDisciplina DesagregadaVETERINARIA Y ESP. PECUARIAS-OTRASCampo de AplicaciónSanidad animal-OtrosActividad IndustrialInvestigación y desarrollo experimental en el campo de las ciencias médicasPalabras ClaveSuero policlonal
Animales de laboratorio
Ratones
Bioterio
Generación de anticuerpos
- Servicio de adquisición de imágenes por medio de microscopia confocal. (ST 4714)[+]Detalle STANObtención de imágenes digitales de preparados biológicos que emitan fluorescencia en Cultivos Celulares vivos - Cultivos celulares fijados - Costes histológicos - Preparados Vegetales.MetodologíaEsta metodología permite observar células, estructuras subcelulares, parecencia y localización de moléculas (proteínas, ADN, etc.) interacciones entre proteínas y cascadas de señalización por calcio intracelular, entre otras aplicaciones. Se realiza una evaluación de las muestras a fin de determinar su aptitud para ser analizadas con esta metodología mediante microscopía óptica directa. Luego, se establecen y se configuran los parámetros para la observación de las muestras por microscopía confocal y captura de imágenes. Por último, se elabora un informe detallando la duración del experimento y el número de imágenes obtenidas incluyendo las mismas en formato digital.Disciplina PrimariaCiencias MédicasDisciplina DesagregadaBIOLOGIA-CELULAR Y MOLECULARCampo de AplicaciónSalud humanaActividad IndustrialInvestigación y desarrollo experimental en el campo de la ingeniería y de las ciencias exactas y naturalesPalabras ClaveCONFOCAL
INVERTIDO
IMÀGENES DE ALTA DEFINICIÓN
MICROSCOPIO ÓPTICO
MICROSCOPIO DE FLUORECENCIA
- Identificación Molecular de virus caninos y felinos: 1) Identificación de agentes virales caninos y felinos mediante técnicas de Biología Molecular. 2)
Identificación y posterior secuenciación de los fragmentos obtenidos de muestras positivas.(ST 5915)[+]Detalle STANIdentificación de agentes virales caninos y felinos en muestras biológicas provenientes de perros y gatos; y de animales silvestres. El servicio está dirigido a Veterinarios, criadores, refugios, parques Nacionales, entidades encargadas de la sanidad animal en general.Prestación DetalleProcesamiento de muestras para la detección e identificación de agentes virales caninos y felinos mediante técnicas de Biol. Molecular Se confecciona un Informe con los resultados, se informa detectable o no detectable; el cual no posee carácter de certificación. / Idem anterior y posterior secuenciación de los fragmentos obtenidos. Las secuencias se analizarán y se entregara un informe detallando la identidad de las cepas. Este informe no posee carácter de certificación.MetodologíaA partir de diferentes muestras biológicas de animales sospechados de infección, se realiza la extracción de ácidos nucleicos (ADN/ARN). Luego, mediante técnicas moleculares de amplificación (PCR/RT-PCR), se detectan de manera precisa, sensible y específica, secuencias nucleotídicas correspondientes a diferentes regiones de los genomas de los virus en estudio. * El ADN total, es obtenido de las muestras mediante una lisis, luego se realiza un tratamiento con proteinasa K, y posterior purificación con kit Qiaex II, según instrucciones del fabricante. Luego se realiza la PCR (Reacción en cadena de la olimerasa); utilizando primers específicos (dependiendo de cuál sea el virus a detectar). * Para los Virus cuyo genoma es ARN, se realiza en primer lugar una extracción del ARN con Trizol, (según instrucciones del fabricante); y luego una RT-PCR (Transcripción Reversa-Reacción en cadena de la polimerasa) en presencia de oligonucleótidos específicos para la detección de cada virus a estudiar. La reacción se realiza con el kit One Step (Qiagen). Cada par de primers posee su respectivo ciclado en el termociclador. Para poder visualizar los productos específicos, se realiza un gel de agarosa al 1,0%. Junto con los ADNs obtenidos de las muestras a analizar, se corren en paralelo un control Positivo, el cual se sabe certeramente que posee el ADN de interés, y un control Negativo, que es agua. A posteriori, y en caso de solicitarlo el cliente, se realiza la secuenciación de los fragmentos obtenidos.EquipamientoMicrocentrífuga refrigerada Eppendorf 5415R | Micropipeta automática de volumen variable Gilson, Inc. P1000 | Micropipeta automática de volumen variable Gilson, Inc. P200 | TERMOCICLADOR Ivema Desarrollos SRL T18 | Micropipeta automática de volumen variable Gilson, Inc. P20Disciplina PrimariaBiologíaDisciplina DesagregadaBIOLOGIA-VIROLOGIACampo de AplicaciónSanidad animal-Enfermedades de virusActividad IndustrialServicios de prácticas de diagnóstico n.c.p.Palabras ClaveDiagnóstico molecular
RT-PCR
PCR
- Análisis de Bancos Maestros de semillas virales para producción de vacunas contra virus de pequeños animales: Identificación de agentes virales caninos y felinos mediante técnicas de Biol. Molec. / Identificación de agentes virales caninos y felinos mediante técnicas de Biol. Molec. y posterior secuenciación de los fragmentos obtenidos de muestras positivas.(ST 5941)[+]Detalle STANEl servicio está dirigido a empresas productoras de vacunas para pequeños animales. Análisis de los bancos maestros de semillas virales de producción. El entregable por servicio será un informe de resultados. El mismo no tiene carácter de certificación ni representa la mirada institucional en la toma de decisiones por parte del contratante.MetodologíaA partir de semillas vacunales, se extrae el material genético, y por técnicas de amplificación molecular como la PCR y RT-PCR; se obtienen los fragmentos específicos correspondientes al genoma de los virus en estudio, descartando (o eventualmente detectando) contaminaciones cruzadas. Junto con los ADNs obtenidos de las muestras a analizar, se corren en paralelo un control Positivo, el cual se sabe certeramente que posee el ADN de interés, y un control negativo, que es agua. En caso de solicitarlo el cliente, los fragmentos obtenidos son clonados y secuenciados, para estudiar la identidad de las cepas presentes en las muestras remitidas. Los agentes detectados incluyen: Virus caninos: Parvovirus, PVC; Adenovirus, AVC; Herpesvirus, HVC; Virus Distemper, VDC; Coronavirus, CVC y Rotavirus, RVC; y por otro lado virus Felinos: Calicivirus, CVF; Herpes Virus, HVF y Panleucopenia, VPF.EquipamientoMicrocentrífuga refrigerada Eppendorf 5415R | Micropipeta automática de volumen variable Gilson, Inc. P1000 | Micropipeta automática de volumen variable Gilson, Inc. P200 | TERMOCICLADOR Ivema Desarrollos SRL T18 | Micropipeta automática de volumen variable Gilson, Inc. P20Disciplina PrimariaBiologíaDisciplina DesagregadaBIOLOGIA-VIROLOGIACampo de AplicaciónSanidad animal-Enfermedades de virusActividad IndustrialServicios de prácticas de diagnóstico n.c.p.Palabras ClaveRT-PCR
PCR
Vacunas
Bancos Maestros