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El presente trabajo analiza diferentes estrategias para incrementar la expresión, excreción y recuperación del anticuerpo 14D9 en suspensiones celulares establecidas a partir de dos líneas de N. tabacum transgénicas (con o sin la señal de retención en retículo endoplásmico KDEL) que expresan el anticuerpo 14D9. Las suspensiones celulares fueron obtenidas por transferencia de callos friables (0,2 g) a medio de cultivo MS-RT líquido suplementado con ácido naftalen acético:kinetina (2:0,2 mg/L). Los cultivos fueron incubados en un agitador orbital a 100rpm; 24±10C y 16 hs. de fotoperíodo. Para optimizar la extracción de anticuerpo se utilizaron diferentes estrategias: sonicado, ruptura mecánica con mortero, etapas consecutivas de congelado-descongelado, con dos buffers de extracción (PBS/Leupeptina o tris-HCl/Triton X-100). Las muestras se tomaron, por triplicado, a los 10 días de cultivo. La técnica de elección resultó la correspondiente a dos tratamientos consecutivos de congelado-descongelado seguido de ruptura mecánica con mortero en buffer PBS pH:7.3/Leupeptina 10µg/ml. Se estudió el efecto del agregado de Manitol (90g/l de medio de cultivo) como agente de estrés osmótico. Los estudios de cinética de producción realizados durante 25 días permitieron observar un rendimiento de anticuerpo de 1,2 mg/gPF para la línea sin señal KDEL y 1,4 mg/gPF para la línea con dicha señal. Estos valores son 4,8 y 1,5 veces superiores (respectivamente) respecto al control. Por otra parte se analizo el efecto del agregado de tres concentraciones diferentes (1,5%; 2% y 2,5%) de DMSO agregado a los 3 días de cultivo. Se obtuvo una inhibición marcada del crecimiento celular en ambas líneas y un aumento del nivel de anticuerpo en el medio de cultivo 10 veces superior con respecto al control.