La proteína no estructural 3A del virus de la fiebre aftosa posee dominios esenciales para la replicación viral.

CM LOTUFO; PR GRIGERA; NM MATTION; M WILDA

Montevideo

Congreso; XVI Congreso Latinoamericano de Genética, IV Congreso de la Sociedad Uruguaya de Genética, XLIX Reunión Anual de la Sociedad de Genética de Chile, XLV Congreso Argentino de Genética; 2016

Sociedad Argentina de Genetica

El virus de la fiebre aftosa (VFA) es un virus noenvuelto con genoma ARN de polaridad positiva.Su genoma codifica para 4 proteínas estructuralesy 8 proteínas no estructurales, entre estas últimas seencuentra la proteína 3A, que juega un papel relevanteen la síntesis del ARN y en el anclaje a membranasintracelulares del complejo replicativo, entre otras. Sepropuso identificar en 3A dominios involucrados en lareplicación a través de mutaciones generadas sobre unreplicón del VFA basado en la cepa O1/Campos, bajoregulación del promotor T7 (pRep), el cual codificala región completa de proteínas no estructurales delvirus, y los extremos no traducibles, las proteínascapsidales fueron reemplazadas por el gen reporterode la luciferasa de luciérnaga. Se realizaron delecionessobre el dominio predicto transmembrana (p∆59-76)y en la región N-terminal (p∆6-11, p∆6-17 y p∆6-23) de 3A, y posteriormente se realizaron mutacionespuntuales. Se cotransfectaron células BHK-21con los plásmidos mutantes o controles, pT7pol ypRenilla. A las 16hs post-transfección se midió laactividad luciferasa utilizando el Dual-Luciferase AssaySystem?. Por otro lado, la ubicación intracelularde los replicones que contienen 3A wild type (wt)o las mutantes delecionadas se visualizó mediantela técnica de inmunofluorescencia indirecta. Segúnlos resultados obtenidos, se concluye que la regiónpredicta transmembrana y la región comprendidaentre los aminoácidos 18-23 y particularmente elácido glutámico en la posición 20 poseen un rolesencial en la replicación viral.