ICT - MILSTEIN   05483
INSTITUTO DE CIENCIA Y TECNOLOGIA "DR. CESAR MILSTEIN"
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Identificación de factores de virulencia de Candidatus liberibacter a través de análisis funcional en Saccharomyces cerevisiae
Autor/es:
PABLO SEBASTIÁN TORRES; DAVIA RUIZ ROSA MARIA; MOLINA C; GARCIA L; GMITTER F; VOJNOV AA; MARANO MR ; GADEA J.
Lugar:
Tucumán
Reunión:
Congreso; Encuentro Latinoamericano y del Caribe de Biotecnología REDBIO Argentina; 2015
Institución organizadora:
REDBIO Argentina
Resumen:
La enfermedad de Huanglonbing (HLB) es causada por Candidatus Liberibacterspp (Ca. L.). yrepresenta una gran amenaza para el cultivo de cítricos a nivel mundial debido a que provocaun rápido decaimiento y reducción del tiempo de vida de las plantas infectadas. Recientementese ha observado la dispersión de la enfermedad de manera preocupante en los cultivos del surde Brasil y se ha transformado en un potencial grave problema para productores argentinos,sobre todo de la región tucumana y la Mesopotamia, donde existen grandes plantaciones decítricos destinados a la exportación. Debido a que ya se ha detectado la presencia deDiaphorina citri, en insecto vector, en las provincias de Entre Ríos, Corrientes, Salta y Jujuy, locual implica un riesgo potencial para el establecimiento de la enfermedad, a pesar de nohaberse encontrado hasta el momento poblaciones del vector infectados por Ca. L.. El mecanismo por el cual este patógeno es capaz de promover la enfermedad y bloquear osuperar los mecanismos de defensa de la planta no es conocido. Hasta la fecha, se desconocela función biológica de las proteínas putativas, candidatas de ser factores de virulencia de Ca.L. asiáticus, debido a la imposibilidad de manipular genéticamente a esta bacteria por sucarácter de patógeno intracelular obligado. Identificar dichas proteínas efectoras o factores devirulencia, así como comprender su función molecular y sus dianas en la célula hospedadoraes esencial para la comprensión del mecanismo del establecimiento de la enfermedad HLB. A fin de sortear estas limitaciones, realizamos la expresión heteróloga de proteínas de Ca L.para evaluar su toxicidad en a la levadura Saccharomyces cerevisiae. Utilizando un modelo deinhibición del crecimiento de levadura, pudimos identificar efectores de la bacteria queinterfieran en procesos celulares conservados en eucariotas.Inicialmente seleccionamos 20 genes que fueron amplificados del genoma de Ca L.asiáticus, seclonaron mediante Gateway en el vector de expresión pAG de levadura, fusionados a un TAG dehemaglutinina en la región C-terminal y bajo el control de un promotor inducible por galactosa. De los 20genes candidatos seleccionados, solo uno de ellos reduce el crecimiento de la levadura un 30% en lafase exponencial, en presencia de galactosa. Indicando que la expresión de esta proteína interfiere enalgún proceso biológico conservado de la célula eucariótica.