DESARROLLO DE UNA VACUNA DE NUEVA GENERACION CONTRA INFLUENZA HUMANA

DIEGO CARGNELUTTI; MARIA VICTORIA SANCHEZ; LORENA BOADO; PAULA ALVAREZ; NORA MATTION; EDUARDO SCODELLER

Ciudad Autonoma de Buenos Aires

Congreso; X CONGRESO ARGENTINO DE VIROLOGIA; 2011

Sociedad Argentina de Virologia

La gripe o influenza es una enfermedad respiratoria aguda con un elevado impacto sobre la salud pública mundial. Su agente causal es el virus de influenza y la vacunación es la mejor manera de controlar la infección. ISCOMATRIX (IMX) es un adyuvante basado en ISCOPREP, saponina extraída de la corteza del árbolQuillaja saponaria. El uso de la nucleoproteína recombinante (NPr) como antígeno vacunal, deriva del hecho de que la NP muestra una menor variación antigénica respecto a las glicoproteínas de la superficie viral, como son la hemaglutinina y neuraminidasa. Además, nuevas tecnologías son necesarias para la producción de antígenos vacunales gripales, debido a que la producción de antígenos en huevos embrionados de gallina y su posterior purificación, es un proceso complejo y con limitaciones en su capacidad de expansión. El objetivo de este trabajo es describir la producción e inmunogenicidad de la NPr, del virus de influenza A/Puerto Rico/8/34 (H1N1), junto con IMX como formulación vacunal. El gen de la NP del virus de influenza A/Puerto Rico/8/34 (H1N1) fue insertado en el vector pET-30a y usado para expresar la proteína recombinante en Escherichia coli BL21. Ratones BALB/c fueron vacunados por vía subcutánea con un régimen de prime/boost homólogo con 10μg de la NPr (grupo control) y con 10μg de la NPr formulada con 11μg de IMX (grupo experimental). En el día 36 post-prime, se evalúo la respuesta inmune humoral determinando el título de IgG total y de los isotípos IgG1 e IgG2a. Al mismo tiempo, la repuesta inmune celular, fue evaluada por ensayos de linfoproliferación y determinación de las citoquinas INF-γ, IL-10 e IL-4. La inmunización con NPr indujo seroconversión en ambos grupos. Sin embargo, la NPr formulada con IMX, incrementó el título de IgG anti-NP con un media de 82.000, además generó un aumento en la proporción IgG2a/IgG1, desde 0,23 para el grupo control a 0,52 para el grupo experimental. Los ensayos de linfoproliferación efectuados, 3H-timidina y MTT, demostraron una mayor respuesta linfoproliferativa en el grupo inmunizado con NPr-IMX. La inmunización con NPr-IMX resulto en un incremento en la producción de IFN-γ (p