Interacción entre el Virus de la Diarrea Viral Bovina (VDVB) infectivo e inactivado con las células dendríticas

FRANCO MAHECHA, OLGA LUCÍA; BUCAFUSCO, DANILO; MALACARI, DARÍO; GRAVIZACO, MARÍA J; PÉREZ FILGUEIRA, D MARIANO; GRIGERA, PABLO; ALEJANDRA CAPOZZO

Congreso; X Congreso Argentino de Virología; 2011

AAM. Sociedad Argentina de Virología

INTRODUCCION La activación de las células dendríticas (DC) es un mecanismo crucial por el cual se inicia la respuesta adaptativa. BVDV causa inmunosupresión, posiblemente debido a un efecto inhibidor sobre la actividad de las DC. Trabajos previos demostraron que VDVB es capaz de infectar a las DC después de las 24h del inicio de la interacción virus-DC, pero no se ha estudiado el efecto del virus a tiempos más cortos. OBJETIVO Estudiar la capacidad del virus BVDV Tipo 1- biotipos citopático (cp) y no citopático (ncp), infectivo o inactivado (BVDVi) de activar y madurar a las células dendríticas. METODOLOGÍA Se utilizaron DC-CD11c+ diferenciadas in vitro a partir de precursores de médula ósea de ratón; y DC-CD11b+ bovinas diferenciadas a partir de monocitos (CD14+) purificados de sangre periférica por separación magnética (anti CD14+). Se obteiene una pureza superior al 90% en ambos casos. Las DC son tratadas con los virus durante 3-6-12h y luego se mide expresión de MHC II y moléculas coestimulatorias por citometría de flujo. La infección se estudió por IFI. La viabilidad celular se determinó mediante marcación con Anexina V(PE)/7AAD. RESULTADOS El virus inactivado reguló negativamente la expresión del MHC II y moléculas co-estimulatorias en DC murinas; el efecto sobre la expresión del MHC II fue igualmente negativo al tratar las DC con virus infectivo tanto citopático como no citopático. En DC bovinas el VDVB se comporta diferente según el biotipo. Ambos biotipos virales, tanto infectivos como inactivados, no estimulan la expresión de MHC II en DC bovinas. El efecto no es reversible con la posterior estimulación con otro antígeno (LPS). La infección de DC con BVDV cp produce una regulación negativa sobre la expresión del MHC que se reduce aún más al estimular las células infectadas con LPS. Se observa expresión de proteínas no estructurales (por IFI) a las 3h de incubación con el virus, que continúa hasta las 17h post contacto. CONCLUSIONES Los componentes proteicos estructurales del VDVB podrían tener un efecto regulador negativo sobre la activación de las DC. El virus cp es capaz de infectar activamente a las DC y las mantendría un estado inactivo, impidiendo la iniciación de la respuesta inmune, incluso contra otros antígenos. La capacidad del VDVB de replicar en DC y arrestarlas en el estado inmaduro podría ser evidencia de un mecanismo de escape a la respuesta inmune y explicaría en parte la nulidad de la respuesta humoral que se observa en los bovinos hasta las 2-3 semanas post infección.