Titulaciones Ácido-Base de Albúmina Sérica Humana (ASH). Efecto en la Estructura y en la Capacidad de Interaccionar con Boldina

CANDELARIA I. CÁMARA; FABIANA Y. OLIVA

Salta Argentina

Congreso; XVI Congreso Argentino de Fisicoquímica y Química Inorgánica; 2009

Asociación Argentina de Fisicoquímica

La Albúmina Sérica Humana (ASH) es la principal proteína plasmática que interacciona con un amplio espectro de compuestos debido a su flexibilidad conformacional y a la gran variedad de sitios de unión que se encuentran en sus dominios. Entre los compuestos que se unen a la ASH se encuentran ácidos grasos de cadena larga, otras proteínas, fármacos y principalmente iones orgánicos hidrofóbicos de tamaño medio (100-600Da) [1]. La ASH esta compuesta por aminoácidos dentro de los cuales se encuentran 18 residuos tirosinas y un residuo triptofano [2], principales grupos cromóforos por poseer sistemas de enlaces p conjugados. Debido a que estos grupos poseen absorción en el UV (principalmente entre 240-300 nm) y a su vez presentan propiedades fluorescentes, el estudio de la unión de ligandos a la proteína puede ser analizada por espectrofotometría UV-visible y espectroscopia de fluorescencia. La  boldina, componente principal de la hoja del arbusto de boldo, es un alcaloide con propiedades antioxidantes hidrofóbico, característica conferida principalmente por la presencia de heterociclos conjugados. Es debido a estas propiedades que consideramos que esta molécula puede unirse a la ASH. En este trabajo se analiza el efecto de condiciones experimentales tales como pH y fuerza iónica en el desarrollo de carga y en la estructura de la proteína, y se evalúa mediante el uso de técnicas espectroscópicas, el efecto que estos parámetros producen en la interacción con boldina. En primera instancia se analizó el comportamiento UV visible en función del pH del medio de ambas moléculas, observándose tanto en el caso de la ASH como de la boldina, un corrimiento hipsocrómico (hacia mayores longitudes de onda) con el aumento del pH. Se postula que éste corrimiento se debe a la perdida del protón de un grupo fenol que se encuentra tanto en el residuo triptófano presente en la ASH como en la molécula de boldina. Posteriormente se estudió la interacción entre boldina y ASH en distintas relaciones molares a través espectroscopias de fluorescencia y UV-visible, como también a través de otras técnicas. Los estudios de la interacción mediante espectroscopia de fluorescencia mostraron un proceso de quenching entre ambas moléculas en relaciones molares bajas. En tanto que mediante UV-visible no  se observó una variación marcada del espectro de la mezcla a medida que se aumenta la concentración de boldina, lo cual es indicativo de que la interacción no altera la conjugación inter-anillo y su resonancia extendida. Podemos afirmar entonces que la interacción boldina-ASH no afecta la conjugación de los anillos aromáticos, y que ocurre mediante un quenching dinámico [3] cuyas constantes son del orden de 106M, en diferentes condiciones de pH.