Inmunosensor plasmónico para la detección de galectina 3 basado en el uso de óxido de grafeno?una novedosa alternativa para la detección temprana de infarto.

EMILIANO N. PRIMO; SOLEDAD BOLLO; M. KOGAN; MARÍA D. RUBIANES; GUSTAVO A. RIVAS

La Plata

Congreso; VIII Congreso Argentino de Química Analítica; 2015

La detección temprana de afeccionescardíacas es de vital importancia en la medicina actual ya que, de acuerdo conestadísticas del Ministerio de Salud de la Nación, los ataques cardiovascularesson la principal causa de muerte en Argentina. La bioquímica clínica se hafocalizado en la investigación de nuevos marcadores tempranos de infarto demiocardio, requiriéndose metodologías analíticas altamente sensibles yselectivas que posibiliten la detección de estos biomarcadores en fluidosbiológicos. En este sentido, el desarrollo de plataformas sensoras basadas enel uso de nanomateriales derivados del carbono representa una importantealternativa por sus conocidas ventajas como alta relación de aspecto,biocompatibilidad, resitencia térmica y elevada conductividad eléctrica.El objetivo del presente trabajo es eldesarrollo de un inmunosensor plasmónico basado en la inmovilización de unanticuerpo monoclonal para galectina3 (Anti-Gal3) sobre estructurasautoensambladas de óxido de grafeno (GO) y el policatiónpolidialildimetilamonio (PDDA) sobre sustratos de Au. La detección del eventode biorreconocimiento se realizó mediante resonancia de plasmón superficial(SPR). Se evaluó el efecto del número debicapas PDDA/GO sobre Au modificado con el tiol ácido 3-mercaptopropanosulfónico(MPS) en la adsorción de albúmina tomada como modelo para la posteriorinmovilización del anticuerpo. Se siguió el crecimiento de la multiestructura empleando SPR, espectroscopia deimpedancia electroquímica (EIE) y espectroscopía UV-Visible. A pesar de que elcrecimiento en masa de las bicapas (PDDA/GO) es lineal, esto no se tradujo enun crecimiento lineal de la cantidad de proteína inmovilizada debido a la altainterpenetración de las capas en el autoensamblado. Se encontró que con n = 4 se alcanza el máximo cubrimientode proteína, por lo que la plataforma biosensora elegida para la inmovilizaciónposterior del anticuerpo fue Au/MPS/(PDDA/GO)4.La detección de la proteína Gal3 sellevó a cabo siguiendo la señal in-situdel ángulo de SPR. El método desarrollado posibilitó no sólo la detección selectivade Gal3 frente a otras proteínas interferentes del suero sanguíneo sino quepermitió su determinación en concentraciones por debajo de 24,1 mg mL-1(68 pM), límite a partir del cual se concluye que el paciente tiene una elevadaprobabilidad de sufrir un infarto de miocardio. El biosensor propuesto resultasumamente promisorio para posteriores aplicaciones analíticas empleando otrasalternativas de la transducción de la señal analítica u otros elementos debiorreconocimiento dirigidos a la cuantificación de biomarcadoresde infarto.