Estudio de la asociación de Albúmina Sérica Humana con el complejo Tris-5-cloro-1,10fenantrolina Cromo (III) para su potencial uso en Terapia Fotodinámica

P. F. GARCIA

Rosario

Congreso; XVIII Congreso Argentino de Fisicoquímica y Química Inorgánica; 2013

Introducción: En los últimos años se ha demostrado que los complejos fenantrolínicos de Cr(III) podrían tener actividad fototóxica, siendo buenos candidatos para ser usados en Terapia Fotodinámica (PhotoDynamic Therapy=PDT). Las albúminas séricas son proteínas de transporte que podrían ser utilizadas como carriers de drogas al interior celular. Este trabajo se basa en estudiar la asociación del complejo Tris-5-Cloro-1,10Fenantrolina Cromo (III), a una albúmina sérica para el potencial uso en la PDT. En este caso nos centramos en la asociación de un complejo fenantrolínico de Cromo (III) sustituido en la posición 5, con Cloro, a la albúmina sérica humana (HSA= Human Serum Albumin). Esta proteína bien conocida, es una de las más abundantes en el cuerpo humano y de gran importancia debido a su capacidad para transportar diversos sustratos en el plasma sanguíneo. Objetivos: En el presente trabajo nos propusimos caracterizar la asociación del complejo antes mencionado con la HSA. Siguiendo el quenching de la fluorescencia de la proteína a diferentes temperaturas y a diferentes longitudes de onda de excitación (λexc), se determinaron los parámetros de asociación. Las constantes de asociación (Kb) fueron determinadas para cada temperatura, aplicando el modelo de Bhattacharya y usando la ecuación de Van’t Hoff fue posible encontrar los parámetros termodinámicos. Resultados: Los resultados muestran que el complejo de Cr(III) se asocia a la proteína con constantes de asociación del orden de 105 M-1. La excitación de la proteína a 280nm lleva a la excitación de los residuos triptófano y tirosina, por lo que observamos la emisión de ambos aminoácidos; mientras que si excitamos a 295nm solo se observa la emisión del triptófano. Los resultados experimentales, en este sentido, muestran una diferencia en los perfiles de quenching. Determinando la constante de asociación a distintas temperaturas se encontraron los parámetros termodinámicos, ΔH=37,55kJ/mol, ΔS=229,84J/mol.K y ΔG= - 30,94kJ/mol a 298K. Conclusiones: La asociación del complejo con la HSA es espontánea y corresponde a un proceso endotérmico y favorecido entrópicamente. De los ensayos a distintas λexc se desprende que tanto los residuos tirosina como el único residuo triptófano se encuentran involucrados en el proceso de asociación. De acuerdo con los parámetros termodinámicos y al modelo de Ross y Subramanian podemos suponer que las fuerzas de interacción son principalmente hidrofóbicas y electrostáticas.