Efecto fotot¨®xico de [Cr(phen)3]3+ sobre el metabolismo oxidativo en Staphylococcus aureus

PAULINA PÁEZ; CLAUDIA M. BAZÁN; INÉS ALBESA; MARÍA C. BECERREA; ARGÜELLO, GERARDO ANÍBAL

Cordoba

Congreso; Congreso AAIFQ; 2011

ver resumen Introducci¨®n: La actividad fotodin¨¢mica de diferentes compuestos qu¨ªmicos hacia los microorganismos est¨¢ basada en el concepto de que un compuesto qu¨ªmico, com¨²nmente llamado fotosensitizador, se localiza preferentemente en el microorganismo y se activa por bajas dosis de luz visible de una longitud de onda apropiada para generar especies reactivas del ox¨ªgeno (ERO) las cuales son t¨®xicas para los microorganismos. Debido al surgimiento de bacterias resistentes a antibi¨®ticos, las investigaciones en Terapia Fotodin¨¢mica antimicrobiana constituir¨ªan una alternativa para el tratamiento de infecciones [1,2]. Recientemente en nuestro laboratorio se ha demostrado que los complejos polipirid¨ªnicos del Cr(III), [Cr(NN)3]3+, se asocian a modelos biol¨®gicos (prote¨ªnas, ADN, etc.) produciendo la fotofragmentaci¨®n de los mismos y fueron propuestos como posibles candidatos a ser aplicados como fotosensitizadores en Terapia Fotodin¨¢mica [3,4]. Recientemente en nuestro laboratorio se ha demostrado que los complejos polipirid¨ªnicos del Cr(III), [Cr(NN)3]3+, se asocian a modelos biol¨®gicos (prote¨ªnas, ADN, etc.) produciendo la fotofragmentaci¨®n de los mismos y fueron propuestos como posibles candidatos a ser aplicados como fotosensitizadores en Terapia Fotodin¨¢mica [3,4]. Recientemente en nuestro laboratorio se ha demostrado que los complejos polipirid¨ªnicos del Cr(III), [Cr(NN)3]3+, se asocian a modelos biol¨®gicos (prote¨ªnas, ADN, etc.) produciendo la fotofragmentaci¨®n de los mismos y fueron propuestos como posibles candidatos a ser aplicados como fotosensitizadores en Terapia Fotodin¨¢mica [3,4]. Objetivos: El objetivo del presente trabajo es avanzar sobre la posibilidad del uso de los [Cr(NN)3]3+ en Terapia Fotodin¨¢mica antibacteriana investigando la capacidad del complejo [Cr(phen)3]3+ de generar ERO en Staphylococcus aureus, pat¨®geno de relevancia cl¨ªnica, y evaluando la potencialidad de [Cr(phen)3]3+ como agente fotot¨®xico. El objetivo del presente trabajo es avanzar sobre la posibilidad del uso de los [Cr(NN)3]3+ en Terapia Fotodin¨¢mica antibacteriana investigando la capacidad del complejo [Cr(phen)3]3+ de generar ERO en Staphylococcus aureus, pat¨®geno de relevancia cl¨ªnica, y evaluando la potencialidad de [Cr(phen)3]3+ como agente fotot¨®xico. Resultados: Los estudios fueron realizados en cultivos overnight de S.aureus ATCC 29213. Mediante la t¨¦cnica de NBT (Nitroblue tetrazolium) se determin¨® la generaci¨®n de ERO [4] en la cepa de referencia de S.aureus incubada con 0,1; 1 y 10 ¦Ìg/mL de [Cr(phen)3]3+ en ausencia y en presencia de luz a diferentes tiempos de irradiaci¨®n con l¨¢mparas de F 40W/54 Daylight 2400 Lm. La intensidad de las l¨¢mparas fue medida por actinometr¨ªa siendo ¨¦sta de 2 x 1014 fotones cm-2 s-1. A tiempos cortos de irradiaci¨®n, en presencia del [Cr(phen)3]3+, no se observaron cambios significativos en la generaci¨®n de ERO respecto a la muestra sin irradiar. Luego de 4 h de irradiaci¨®n en presencia del complejo pudo observarse un mayor aumento de ERO intracelular con respecto al extracelular, el cual fue mayor en presencia que en ausencia de luz. A tiempos prolongados de irradiaci¨®n la presencia del complejo redujo la viabilidad de S.aureus observ¨¢ndose una reducci¨®n de las ERO intracelulares. Los estudios fueron realizados en cultivos overnight de S.aureus ATCC 29213. Mediante la t¨¦cnica de NBT (Nitroblue tetrazolium) se determin¨® la generaci¨®n de ERO [4] en la cepa de referencia de S.aureus incubada con 0,1; 1 y 10 ¦Ìg/mL de [Cr(phen)3]3+ en ausencia y en presencia de luz a diferentes tiempos de irradiaci¨®n con l¨¢mparas de F 40W/54 Daylight 2400 Lm. La intensidad de las l¨¢mparas fue medida por actinometr¨ªa siendo ¨¦sta de 2 x 1014 fotones cm-2 s-1. A tiempos cortos de irradiaci¨®n, en presencia del [Cr(phen)3]3+, no se observaron cambios significativos en la generaci¨®n de ERO respecto a la muestra sin irradiar. Luego de 4 h de irradiaci¨®n en presencia del complejo pudo observarse un mayor aumento de ERO intracelular con respecto al extracelular, el cual fue mayor en presencia que en ausencia de luz. A tiempos prolongados de irradiaci¨®n la presencia del complejo redujo la viabilidad de S.aureus observ¨¢ndose una reducci¨®n de las ERO intracelulares. Conlusi¨®n: Los resultados obtenidos aportan la primera evidencia de actividad fotot¨®xica antibacteriana del complejo [Cr(phen)3]3+ en S.aureus a trav¨¦s de la alteraci¨®n del metabolismo lo cual lleva a la p¨¦rdida de la viabilidad bacteriana. Los resultados obtenidos aportan la primera evidencia de actividad fotot¨®xica antibacteriana del complejo [Cr(phen)3]3+ en S.aureus a trav¨¦s de la alteraci¨®n del metabolismo lo cual lleva a la p¨¦rdida de la viabilidad bacteriana.