INFIQC   05475
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES EN FISICO- QUIMICA DE CORDOBA
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Avances en la interacción de los complejos polipiridínicos del Cr(III) con la holotransferrina y su potencial importancia en la terapia fotodinámica
Autor/es:
PABLO F. GARCIA; JUDITH TONEATTO; GERARDO A. ARGÜELLO
Lugar:
Córdoba
Reunión:
Congreso; XVII congreso Fisicoquímica y Química Inorgánica; 2011
Resumen:
 Nuestro interés se centra en el estudio de los complejos polipiridínicos del Cr(III) y su potencial uso como sensibilizadores en la Terapia Fotodinámica (PDT=PhotoDynamic Therapy). La estrategia de la PDT, está basada en promover la muerte de células neoplásicas y la erradicación del tumor mediante la generación fotoquímica in situ de especies citotóxicas altamente reactivas. Una característica distintiva de las células neoplásicas respecto de las normales es la sobreexpresión de receptores de transferrina en membrana plasmática. Este hallazgo ha sido el punto clave que motivó la investigación de los complejos polipiridínicos del Cr(III) con propiedades como sensibilizadores a transferrina, dado que sería una alternativa interesante para lograr la acumulación selectiva del sensibilizador en células tumorales, dando especificidad a la reacción de fotooxidación.  Para avanzar en el conocimiento del proceso de asociación entre los complejos del Cr(III) y proteínas de transporte se caracterizó el proceso de asociación entre [Cr(phen)3]3+ y holo-Transferrina (holoTf) haciendo uso de diferentes técnicas espectroscópicas tales como: espectroscopía de fluorescencia, UV-visible y dicroísmo circular (DC). Motivados por revelar cuan afín es el complejo metálico por el sitio de unión de la proteína, se determinaron las constantes de asociación a diferentes temperaturas. Los parámetros termodinámicos fueron analizados con el fin de caracterizar las fuerzas de interacción involucradas. Para revelar los posibles cambios estructurales se uso DC .  A partir del análisis de los datos experimentales se puede observar que la presencia de [Cr(phen)3]3+ produce una importante inhibición (quenching) de la fluorescencia de holoTf. De los datos de fluorescencia, mediante el uso de la ecuación de Bhattacharyya, se determinaron las constantes de asociación (Kb) a diferentes temperaturas obteniéndose valores de constantes comprendidos entre 1,0 x105 – 3,49 x105 M-1. A partir de las Kb, se calcularon los parámetros termodinámicos, obteniéndose valores de ∆H y ∆S positivos y ∆G negativos. Los espectros de dicroísmo circular no mostraron cambios significativos cuando la proteína se encontraba en presencia del complejo metálico.  El complejo [Cr(phen)3]3+ se asocia con alta afinidad a holoTf. El proceso de asociación es espontáneo y, a pesar de un evidente balance entálpico positivo, la unión está guiada por factores entrópicos. Estos resultados permiten asumir que las interacciones de tipo hidrofóbicas cumplen un rol importante en la asociación. No obstante, las interacciones electrostáticas se hacen presentes para estabilizar el proceso de unión. Los resultados aquí expuestos demuestran que la asociación sobreviene sin cambios apreciables en la estructura terciaria de la proteína, lo que indicaría que el complejo metálico en estudio ocuparía un sitio de unión diferente al del Fe3+, probablemente en una zona hidrofóbica o más conocido por hydrophobic patches, próxima a estos sitios, en el que participan residuos de Trp y Tyr, entre otros.