IMBIV   05474
INSTITUTO MULTIDISCIPLINARIO DE BIOLOGIA VEGETAL
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Amoxicillin-conjugated gold nanoparticles used in Antimicrobial Photodynamic Therapy. Formulation of gel for topical application
Autor/es:
DIAMELA M. ROCCA; M. JAZMÍN SILVERO, VIRGINIA AIASSA; M. CECILIA BECERRA
Lugar:
La Plata
Reunión:
Congreso; V Reunión GRAFOB 2020; 2020
Institución organizadora:
UNLP
Resumen:
Alrededor del 80% de las infecciones bacterianas están relacionadas con la formación de biofilms, representando uno de los problemas más grandes en salud pública debido a la continua aparición de resistencia a la terapia antibiótica convencional, siendo hasta 100 ó 1000 veces más resistentes que las bacterias en estado libre o planctónico (1). El uso de nanopartículas (NP) metálicas como fotosensibilizadores en Terapia Fotodinámica Antimicrobiana (PACT) surge como alternativa a esta problemática.En el presente trabajo se evaluó la actividad antimicrobiana de amoxi@AuNP en PACT (2), en biofilms de cepas clínicas de Pseudomonas aeruginosa (PAE) y Staphylococcus aureus meticilino resistente (SAMR) mediante microscopía electrónica de barrido (SEM) y mediante microscopía confocal de barrido láser (CLSM) para determinar la viabilidad en los biofilms. Por último se realizó una formulación farmacéutica de las amoxi@AuNP para aplicación tópica.Los biofilms de SAMR y PAE se expusieron a irradiación con 1,5 µg/mL amoxi@AuNP durante 3 horas. Las imágenes SEM revelaron la interacción de las amoxicilina@AuNP sobre la matriz del biofilm y las células bacterianas, daños en la integridad de la matriz extracelular del biofilm y una reducción en la densidad de grupos celulares con respecto al control. En el control sin NP, las células bacterianas conservaron sus paredes celulares intactas. Mediante el uso del software Fiji-ImageJ® fue posible calcular el área del biofilm maduro y los porcentajes de reducción del biofilm luego del tratamiento con PACT. Se observó una reducción del biofilm respecto del control en SAMR y PAE del 55% y 70% respectivamente. La viabilidad celular en biofilm maduro de la cepa clínica de PAE fue determinada mediante CLSM utilizando naranja de acridina (NA), las imágenes obtenidas revelaron una disminución de la viabilidad celular del biofilm luego de 3 h de irradiación con amoxi@AuNP, correspondiente a la disminución de intensidad de fluorescencia verde en comparación con el control, además se observó fluorescencia roja después del tratamiento, lo que se asocia a la pérdida de viabilidad bacteriana (3).Se realizó una formulación de tipo hidrogel para aplicación tópica de las amoxi@AuNP, utilizando el agente gelificante carbopol ultrez 10. La formulación se realizó a partir del método de dispersión, en donde una concentración al 1% del carbopol fue dispersada sobre una suspensión de amoxi@AuNP de concentración 1,5 ug/mL. El análisis de la estabilidad de los geles se llevó a cabo mediante estudios de estabilidad acelerada a 40 °C, 75% humedad relativa durante dos meses. El comportamiento viscoelástico y el pH de la formulación permanecieron estables.Se concluye que la PACT con amoxicilina@AuNP tendría un excelente potencial para el tratamiento de enfermedades infecciosas causadas por biofilms de PAE y SAMR, y mediante su vehiculización en geles para el tratamiento tópico.