Combinación de ácido úsnico y fluconazol y sus efectos sobre el estrés oxidativo de biofilms de Candida albicans

LOMBARDO CARAMELO ANDREA; GALLERANO LUCIANO; PERALTA MARIANA A; CABRERA JOSE L.; PARAJE, MARÍA G

Jornada; XXV JORNADA DE JÓVENES INVESTIGADORES DE LA ASOCIACIÓN DE UNIVERSIDADES DEL GRUPO MONTEVIDEO; 2017

En trabajos previos informamosla actividad inhibitoria del biofilm de una cepa de Candida albicans resistente a azoles, CaR, por parte de ácidoúsnico (AU), obtenido del liquen argentino Usneaamblyoclada. El presente trabajo propone la sensibilización del biofilms deCaR hacia fluconazol (FLU),combinándolo con un AU.AU se purificó apartir de U. amblyoclada. La cepa de CaRfue aislada de la cavidad bucal, y sobreexpresa genes de bombas de eflujo deazoles.La formación de biofilms se realizó en placade 96 pocillos.  Diferentes concentracionesde AU (0,25 a 4 µg/ml), FLZ (0,5 a 2 µg/ml) o combinaciones de ambos seañadieron a los biofilms maduros. Después del tratamiento antifúngico, se lavó elbiofilm con PBS y se tiñó con Cristal Violeta y se midió la absorbancia a 595nm.Las Especies Reactivas deOxígeno (EROs) se midieron en el sobrenadante de los biofilms, después de cadatratamiento, mediante reducción de nitro-blue tetrazolium (NBT).  Se midió absorbancia a 540 nm.Lacombinación de AU (0,25 µg/ml) y FLU (0,50 µg/ml) inhibió un 80% el biofilms deCaR, efecto mayor al obtenido con estas concentraciones en forma aislada. Asimismo,se observó un incremento de las EROs en el biofilm tratado con la mismacombinación de los compuestos, con respecto al biofilm basal.  Los resultados obtenidos sugieren que AUposee actividad potenciadora de la actividad de fluconazol en biofilms de C. albicans azol-resistente, conincremento del estrés celular en el biofilms.