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ACTIVIDADANTIBIOFILM DE ÁCIDO USNICO CONTRA CEPAS RESISTENTES A LOS AZOLES daSilva MA1, Ortega MG2, Cabrera JL2, Paraje MG1,Peralta MA2 1 CONICET,Instituto Multidisciplinario de Biología Vegetal (IMBIV); Cátedra deMicrobiología Facultad de Ciencias Exactas Físicas y Naturales, UniversidadNacional de Córdoba.2 CONICET,Instituto Multidisciplinario de Biología Vegetal (IMBIV); Universidad Nacionalde Córdoba, Facultad de Ciencias Químicas.e-mail: maperalta@fcq.unc.edu.arIntroducciónLa aparición continua de las infecciones con cepas de Candida resistentes a los antifúngicosrequiere la búsqueda constante de nuevos fármacos antifúngicos y la floranativa es una fuente importante de nuevas estructuras químicas. El ácido úsnico(AU) es un compuesto obtenido a partir de líquenes. Varios estudios informan acerca de que AU inhibe el crecimiento de diferentes bacterias y loshongos. Sin embargo, aún se desconoce elmecanismo de su actividad antimicrobiana y su acción sobre biofilms de levaduras. ObjetivoEl objetivo de este trabajo cuantificar la acción de AU como un agente anti-biofilms estudiando la acción sobre una cepa resistente a losazoles (RCA) y otra sensible (SCA) de Candidaalbicans y comparando con Fluconazol (FLZ).Materiales y MétodosCompuesto: AU se purificó a partir del extracto bencénico de líquenes del género Usnea. Microorganismos: cepas de C.albicans aisladas de la cavidad bucal, una sensible (SCA) y una resistentea azoles (RCA) que sobre expresa genes transportadores de bombas de eflujo de tipo CDR1, CDR2 y MDR1Formación de biofilms: se midió por adhesión a placa de y cuantificómediante tinción con Cristal Violeta (CV) y lectura espectrofotométrica de laDensidad Óptica (DO). Se realizó el recuento de Unidades Formadoras de Colonias(UFC/mL)Efecto antifúngico: Diferentes concentraciones de AA (2-128 mg / ml) disuelto en dimetilsulfóxido (DMSO) o FLZ (0,25 a 2 mg / ml) se añadieron a cada pocillo que contiene el biofilms maduro. Se determinó la Concentración Inhibitoria Mínima (CIM) por el Método de microdiluciónpara levaduras, según protocolo ?Métodosestandarizados por el CLSI M27- A3) y la concentración de UA o FLZ que logra lainhibición máxima del (BIC) Se añadieron 100 microlitro por pocillo de las soluciones deantifúngicos con el fin de obtener concentraciones finales de FLZ (0,25 a 2 mg/ ml) y AU (2-128 mg / ml). Después de la inoculación, la placa demicrotitulación se incubó a 37 ° C durante 48 h, y OD se midió a 595 nm. Despuésdel tratamiento antifúngico, el sobrenadante se eliminó, lavó y sonicó. Serealizó el recuento de Unidades Formadoras de Colonias (UFC/mL) para los estudios de correlación con BBU. ResultadosUA (4 mg / ml) fue determinada como la Concentración Inhibitoria Biofilm(BIC), ya que mostró la inhibición máxima de biofilms en ambas cepas: 87,84%para SCA(*** p> 0,001) y 71,08% para y RCA (** p> 0,01). Valores deinhibición similares se obtuvieron con 2 mg / ml de FLZ (BIC de FLZ). Lascélulas viables se determinaron por unidades formadoras de colonias pormililitro de enumeración (CFU / ml) y los resultados mostraron una buenacorrelación con el ensayo CV..ConclusiónEl biofilm C. albicans seredujeron en presencia de AU, incluso en RCA. Como era de esperar para una cepasensible, se observó que la inhibición fue más significativa en el biofilms deSCA. Los resultados obtenidos potencian la importancia de AUcomo un antifúngico antibiofilms que se podría utilizar para tratamientoscontra C. albicans y abriendo nuevasperspectivas para realizar estudiossobre ensayos de combinación con otros antifúngicos con el fin de mejorar eltratamiento de biofilms de C. albicansresistentes a antifúngicos clínicos.