La tolerancia oral de la encefalomielitis autoinmune experimental (EAE) con subunidad B de la toxina l¨¢bil al calor de E. coli fusionada al dominio C de sinapsina LTBSC genera un aumento en la poblaci¨®n de c¨¦lulas T CD4+CD25+

SCERBO, M. JULIA; BIBOLINI, MARIO J.; ROTH, GERMAN A.; MONFERRÁN, CLARA G.

La Falda, Córdoba (Argentina)

Congreso; LVI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2008

Sociedad Argentina de Inmunología

Se realizaron ensayos de tolerancia oral en ratas Wistar empleando la subunidad B de la toxina lábil al calor de E. coli (LTB) fusionada al dominio C de sinapsina (LTBSC) (10 mg), una mezcla equimolar de LTB+SC o vehículo administrados en 4 dosis antes de la inducción activa de la EAE con una emulsión de mielina en adyuvante de Freund completo. LTBSC produjo una disminución en la incidencia de la EAE del 50 % (p<0,05) y en las alteraciones histopatológicas observadas en médula espinal mientras que en el grupo de animales tratados con LTB+SC la disminución de la incidencia fue del 20 %. Atento a que la aparición de los signos clínicos y las lesiones histopatológicas en la EAE se asocia a la infiltración del SNC por macrófagos y linfocitos T CD4+ autoreactivos productores de citocinas inflamatorias, se realizó la determinación fenotípica de poblaciones celulares CD4+, CD4+CD25- y CD4+CD25+. Para ello se extrajeron los nódulos linfóticos mesentéricos (NLM), ganglios linfáticos inguinales (GI) y bazo (B) de animales sacrificados el día previo a la inducción activa de la EAE y durante el período agudo de la enfermedad. Los estudios fenotípicos se realizaron en las suspensiones celulares por citometría de flujo. Además en los animales inmunizados para inducir EAE se determinaron los niveles de IFN-g e IL10 en sobrenadantes del cultivo de las suspensiones celulares. Los animales tratados con LTBSC previo al desafío para EAE mostraron un aumento con respecto al control en el porcentaje de células CD4+CD25+ en NLM (p<0,01), GI (p<0,05) y B (p<0,05), mientras que los animales tratados con la mezcla LTB+SC mostraron un incremento en NLM (p<0,05) y GI (p<0,05). En los animales tolerizados con LTBSC y desafiados para la EAE se observó un aumento significativo en el porcentaje de células CD4+CD25+ (p<0,001) y de IL-10 en los tres órganos estudiados (p<0,01) con respecto al grupo control, mientras que los niveles de INF-g disminuyeron excepto en NLM (p<0,05). En el grupo de animales tratados con LTB+SC el aumento en el porcentaje de la población de células CD4+CD25+ e IL-10 fue menos marcado que en el grupo LTBSC, como así también la disminución de INF-g en GI. Los resultados sugieren que LTBSC y en menor grado LTB+SC son capaces de inducir tolerancia periférica posiblemente a través de un mecanismo de supresi¨®n activa con participaciónn de células T regulatorias CD4+CD25+.